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MedjcalPe—odica
中外奠康文摘猢9年2月第B誊第8期WorldIIca儿hDigcst 论 著
渗透,从而影响抗原的活性以及免疫组化染色结暴固定不足,组
织中心部位的一些抗原易溶解,弥敏.丢失t固定时间过久,则 尤其是厚度必须控制在O.3cm以内。
所形成的交联越l紧密,抗原越难以被激活。 3.4固定液必须有足够的量,在体积上一般大于组织20倍
以上。
杨毅等171选择0.5小时至10年问的23个固定时相点的人体正
常胃组织标本,用7种常用抗体进行标记,发现在组织固定J小时 3.5组织固定后应充分水洗,以减少人为假象。
至数年内,多数组织成分对其桕应抗体有阳性表达,但固定时间 4结语
过久则免疫纽化染色减弱或消凫抗原不同对甲醛的耐受时间也 目前在病理实验室一般使用“双固定”,即先将组织浸入10
不同(2周至6年),若经适当的抗原修复,固定10年的标本也有%的甲醛,然后再浸入酒精巾,使组织充分固定。而在医院病理
抗原的阳性表达。另外,若固定胃壁全层组织(长J.5cm,宽0.科,常用10%的甲醛固定组织标本。总之,免疫组化中组织标本
的固定应根据研究目的和不同的组织抗原选择适宜的固定荆,并
3cm)少于1小时,则抗原保存较少,免疫组化染色很弱且定位不
准。熊正文等闻以O.6cm厚的组织为例,研究认为用10%福尔马在保持组织细胞形态完好和所测抗原稳定性的前提下,尽可能采
林在室温固定4.275小时就能达剑日的,而且抗原性受破坏程度用最低浓度的固定剂和最短的固定时间。
也轻。另外,他认为【11活检材料以10%缓冲福尔马林固定3—6小
参考文献
时为最佳条件,最长不要超过12小时。Helande∥的研究提示小
于2—3mm的组织标本,在甲醛中固定24小时就可以充分固定。乙 【l】罗俊铭.钱仲,谭爱玲,等.固定剂和固定时间对保存
醇脱水性强,易引起组织收缩、变硬,影响切片质量,因而乙醇 肺神经内分泌细胞降钙素抗原性的实验研究【J】.湖南医科大学学
固定时间不宜过长(2h内)。 报,1995,20(1):77—79.
2.4固定方法与抗原活性的影响 【2】熊正文,王伯沤,李达,等.固定对IgG抗原活性的影
2.4.1灌注法(1rrigationmethod) 响【J】.临床与实验病理学杂志,1999,15(3):263—264.
此法适用于动物实验研究。自左心室插入主动脉,先以生理 【3】张大红,王琳,李庆明.不同固定剂对免疫组织化学染色
盐水冲冼血液后,以泵、吊筒或50—100ml注射器注入固定液。置效果的影响[J】.实用医技杂志,2005,12(1):155—156.
灌注动物干4℃冰箱内,然后取出组织。外周组织一般在灌注后 【41古德全.固定对免疫组织化学反应的影响【J】.中国组织
30min内取材,取组织置同一固定剂中浸入l一3h,然后修整组织化学与细胞化学杂志,J997,6(1):78—80.
S.Effcctoffixa—
D,JeweU
块。一般光镜下观察的标本室温固定即可获满意效果,也有主张 [5】SrinivasanM,SIe(1mak
tivesandtissue Onthecontentand of
用冷固定荆(4℃)进行灌注。肽类抗原活性在断绝血液供应后24h prOcessing integrity
J
几乎完全丧失。因此,保持组
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