苦碟子注射液治疗贵州小型猪肝纤维化的实验研究_药学论文.docVIP

苦碟子注射液治疗贵州小型猪肝纤维化的实验研究_药学论文 苦碟子注射液治疗贵州小型猪肝纤维化的实验研究_药学论文 作者：赵菊花，吴曙光，巫全胜，郭科男，董小君，李术钗，魏剑林，钱宁 【摘要】 目的观察苦碟子注射液对复合因素所致的贵州小型猪肝纤维化治疗作用。方法贵州小型猪15头，随机分为空白组、模型组、治疗组3组，分成造模和治疗两个阶段。除空白组外的其他2组前8周为造模阶段，用40Igrave;l4橄榄油(0.5 ml/kg)和兔血清(0.5 ml/kg)分别腹腔注射，空白组用橄榄油和生理盐水(NS)各0.5 ml/kg分别腹腔注射，1周两次，共8周;治疗阶段：实验的第9周开始，治疗组给予苦碟子注射液0.8 ml/kg(相当苦碟子生药16g)，其余2组给予NS 0.8 ml/kg，均为每天腹腔注射1次，共28 d。各组分别于实验末处死动物取血和肝组织块，测定血清谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、白蛋白/球蛋白比值(A/G);行HE、Masson染色在光镜下及透射电镜观察肝脏组织病理学变化，以评价肝脏损伤程度和药物的治疗作用。结果①苦碟子注射液能显著降低复合因素所致贵州小型猪肝纤维化动物模型的血清ALT、AST含量(0.01)，减轻肝损伤引起的ALB降低及A/G比例倒置(0.05或0.01);②光镜切片示苦碟子注射液能减轻贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞变性、坏死，使增生的纤维成分减少，甚至消失。③电镜照片显示：苦碟子注射液能减轻贵州小型猪肝纤维化模型的肝细胞损伤，稳定质膜，使细胞间质中胶原纤维沉积减少。结论苦碟子注射液对贵州小型猪肝纤维化模型具有显著的治疗作用，其可能的机制还有待进一步研究。 【关键词】 苦碟子注射液; 贵州小型猪; 肝纤维化; 治疗作用 肝纤维化(HF)是多种慢性肝病的共同病理基础，是肝脏细胞外基质(ECM)合成与降解的不平衡，以致ECM在肝内大量沉积形成肝纤维化。HF是肝硬化的早期阶段和必经阶段，早期肝纤维化得到合理的治疗，其病理变化是可以逆转，但若病因持续存在则有25%～40%最终可能发展成不可逆转的肝硬化乃至肝癌[1～3]，所以阻断和逆转肝纤维化已成为慢性肝病治疗中的一个关键问题。虽然近十余年来针对肝纤维化发生的各个环节进行抗肝纤维化治疗已取得一些进展，但是肝纤维化的治疗仍然是目前临床工作的难点，尚无理想的药物,中医药治疗本病有很好的前景。我们前期工作已从临床、动物实验两方面证实了苦碟子具有确切的活血化瘀功效[4，5]，并对啮齿类动物大鼠实验性肝纤维化有明显的改善作用[6，7]，而偶蹄目类动物贵州小型猪各个器官更接近人类器官，本课题组用苦碟子注射液治疗贵州小型猪肝纤维化模型，取得较好疗效。现报道如下。 　　1 材料 　　1.1 动物贵州小型猪15头(雌性7头,雄性8头)，体质量(2.7±1.1)kg,普通级，由贵阳中医学院动物实验研究所提供。实验前血清谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)﹑白蛋白(ALB)及总蛋白(TP)、白蛋白/球蛋白比(A/G)均正常。饲料由贵州台农饲料有限公司提供。 　　1.2 药物、试剂及仪器苦碟子注射液由沈阳双鼎制药有限公司提供，产品批号041013011，规格10 ml/支，相当200 g生药制成;CCl4(分析纯)由上海三浦化工有限公司生产，批号200303;橄榄油由上海化学试剂分装厂生产，批号200217。血清ALT、AST检测试剂由北京化工厂临床试剂分厂生产，批号041224;Masson染色液由珠海贝索生物技术有限公司生产;兔血清自备，常规紫外线照射消毒后低温保存备用。HITACHI(日立)7020全自动生化分析仪;ReichertE型超薄切片机;H型透射电镜。 　　2 方法 　　2.1 实验分组与方法 将15头贵州小型猪适应性饲养1周，随机分为3组，即：空白组、模型组、治疗组，每组各5头。造模阶段(实验前8周)：除了空白组以外其他两组贵州小型猪前8周用40Igrave;l4橄榄油(0.5 ml/kg)和兔血清(0.5 ml/kg)分别腹腔注射，空白组用橄榄油(0.5 ml/kg)和生理盐水(NS 0.5 ml/kg)分别腹腔注射，1周两次，共8周。治疗阶段：实验的第9周开始，治疗组给于苦碟子注射液0.8 ml/kg(相当苦碟子生药16 g)，其余两组给于NS 0.8 ml/kg，每天腹腔注射1次，共28 d。所有的动物自由饮水和摄食。各组动物分别于第12周末次注药后禁食24 h行前腔静脉采血，收集血清，供血清生化学检测;并处死动物，立即在相同部位取肝组织分别固定于10%甲醛液和4%戊二醛锇酸液，供组织学和电镜观察。 　　2.2 观察指标①一般情况观察;②应用HITACHI(日立)7020全自动生化