出口肉禽免疫新城疫活疫苗后排毒规律地研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集 出口肉禽免疫新城疫活疫苗后排毒规律的研究 孙泉云，张苏华，周锦萍，沈悦，鞠龚讷 (上海市畜牧兽医站，201103) 际贸易间必检的A类传染病，是事关上海地区乃至全国出口禽防疫卫生质量的重要传染病，也是影响和 困扰我市及中国禽类出口的主要疫病，欧盟和日本、韩国等均以从我国出口禽群中分离到新城疫病毒而 停止了对我国的禽类出口贸易，给我国养禽业造成了严重的经济损失，而这其中不少是新城疫的疫苗毒 株所引起。为了恢复和保障我国禽群的顺利出口，为农业创汇和农民增收提供技术支持，增强我市出口 禽场对重点疫病的控制能力，必须组织实施对上海市出口鸡新城疫活疫苗排毒规律及感染状况的调查研 究和针对性摸底检测。为此，我们进行了针对性的调查和实验研究工作。 1、材料 1．1 SPF种蛋：由北京梅里皿维通实验动物技术有限公司提供。 1．2 ND、鸡产蛋下降综合征(EDS)、禽流感(AI)阳性血清和抗原，由哈兽研提供。 1．3 ND弱毒疫苗：分别来自于英特威公司、梅里亚公司等。 1．4试验鸡：来源于上海申藤畜禽有限公司的4个出口肉鸡场，品种为AA肉鸡。 2、方法 2．1出口肉鸡的免疫程序 2．1．1 Lasota胸肌注射(梅里亚公司)。 2．1．2 日龄Avinew饮水免疫(梅里亚公司) 2．2鸡棉拭样品及组织样品的采集：每一鸡场的鸡群按比例随机抽样，每次取样12羽份，分别于鸡群 0．0IMPH7．4PBS管中。组织样品于该批鸡上市屠宰后采 皮粘膜组织和内容物，置于内含双抗的iml 集胸部肌肉25-309，置于样品袋内冻存备用。 2．3 病毒分离 样品，加无菌PBS(0．0IM HI试验分别以新城疫、EDS和禽流感抗血清进行鉴定。 2．4 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立20周年庆典暨第十次学术研讨会论文集 情况，连续8天，正常者记为0，发病记为1分，死亡者记为2分。统计每次观察每只鸡的平均记分值 计算ICPI值，另设10只仅注射生理盐水的1日龄雏鸡作对照。 2．5 并进行基因测序，与NDV疫苗毒株进行同源性比较分析。 3、结果 3．1鸡胚接种试验：鸡胚接种后均未出现死亡，绝大多数鸡胚未见明显病变，仅极个别鸡胚出现体表充 价为2 性反应。所有胸肌样品未检出HA阳性。棉拭样品鸡胚接种后的HA阳性数量和效价见表l。 表1棉拭样品的鸡胚接种试验结果 ＼结果 A免疫程序组HA效价 B免疫程序组HA效价 场别＼ 免后10天 免后14天免后18天免后10天 免后14天免后18天 ＼ 118 5，5，5，4，4，3，31，1，2 O 149 4，4，4，4，5，5，2 O 1，1 184 4，4，3，3．5，5，4，41，2，2，2 l 140 2，3，3，6，3，4，4，52，2，3，4 3 注：HA效价单位为2“。 8天均未发病。 3．3 带。经核苷酸序列及氨基酸序列的同源性分析，证实分离株与疫苗毒株具很高的同源性(99以上)。 4、小结与讨论 4．1经对肉鸡棉拭样品和胸肌样品的鸡胚接种，表明分离毒株能凝集鸡红细胞，并可被特异的ND阳性 析，表明分离株与ND疫苗毒株有很高的同源性。 4．2经病毒分离和实验室鉴定，肉鸡免疫新城疫弱毒疫苗后可产生排毒现象，排毒时间至少不低于2 周。免疫程序和免疫方式的不同，可影响排毒时间的长短和HA效价。由此试验，我们认为出口肉鸡上 市前20—25天内不要进行新城疫弱毒苗的免疫，新城疫最后一次免疫方式宜采用胸肌注射接种，以降低 新城疫疫苗毒检出的可能性。 4．3经我们对试验鸡场的分析指导，发现他们原先制定的A组免疫程序存在明显的欠缺和不合理，25 肉鸡群的NDV检测均为阴性，可见实施科学免疫的重要性。在弄清存在问题的基础上，提出和修改出口 肉鸡的新城疫免疫程序，全面