肺类克雷伯菌与阴沟肠杆菌以及铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因研究.pdfVIP

-285· 三、讨论本研究显示：78株阴沟肠杆菌检出12株产持续二、三代头孢菌素和它们的复合制剂(头孢哌酮／舒巴坦)等耐 药率为100％，而对头孢吡肟敏感，其耐药率为17％；而产 高产AmpC酶，检出率为15．3％，低于吴伟等报道H’[58．3％ 黜b菌株对所有头孢类耐药率均太于90％，但对头孢哌酮 (14,24)】；本研究超广谱日一内酰胺酶(E靶b)，检出率30． ／舒巴坦的耐药率仅为13％。两种酶对喹诺酮类和氨基糖甙 8％，也低于有关报道41．8％(23／55)哺J。这可能与地区不 同．本山区病员以农民为主，头孢类菌的使用相对较少有关。 因此由头孢菌素诱导产酶的菌株也相应偏低。由表1可以看 肠杆菌，可首选亚胺培南或哌拉西林，他唑巴坦作为经验用 出，产酶的阴沟肠杆苗耐药率明显高于不产酶的阴沟肠杆菌 药，对不产酶的阴构肠杆菌可以选用不包括一、二代头孢菌素 的任何一种抗生素作为经验预防用药。 (P0．01)，高产A-npc酶的菌株对头霉烯类(头孢西丁)、 肺类克雷伯菌和阴沟肠杆菌以及铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因研究 植志全江鹏何志恒马劲光 氨基糖苷类药物在临床上不规范和过度使用引致的耐药 i州rrP$各200／』mo[／L，KCl10删／L，(NH4)28048nmDcl／L。 问题受到关注。产生氨基糖苷类修饰酶(钝化酵)、氨基糖苷 M符CE 0． 类抗生素作用靶位16SrRNA基因突变、细胞膜的渗透性下降 及细菌对药物的吸收能下降是耐药的重要机制等，目前通常 按其功能分成乙酰转移酶(AAC)、磷酸转移酶(APH)、核苷转 物在2％琼脂糖凝胶电泳1．5h后，用溴化乙啶染色，凝胶成 移酶(ANT)三类，共30余种．革兰阴性杆菌中发现的主要有 十余种，我们对其中较为常见的6种进行了检测。 像仪观察，并记录结果。 一、材料和方法 6．PcR试剂盒及引物来源：均由无锡市克隆遗传技术研 究所提供。 1．菌株：随机抽取2003年6月～9月医院感染病原菌， =、结果 其中铜绿假单胞菌(Pa)6株、肺炎克雷伯菌(Kpn)8株、阴沟 肠杆菌(Ect)7株；来自痰液16株，脓液2株，尿液、胆管液、皮 肤坏死组织各l株，均产ESBI』、螂或金属酶等。 AK、GM、TO均敏感．仅表现为轻微MIC升高。 2．菌株鉴定及药物敏感试验：采用美国Microsean自动 微生物鉴定系统，NegCcmboPandType21阴性复合板，严格 2．检出氨基糖苷类修饰酶基因的有19株菌，占总数的 按操作程序进行。 90．5％，基因阳性检出率分别为aae(3)一I66．7％、吐c(3)一 3．细菌DNA提取：挑少许MH平板35℃16～18h纯培 57． 养菌落，置内岔100正浓度为200／zg／ml蛋自酶K溶液的0． 8 000r／ 菌株分别有O…3 3和5株，构成比分别为0％、15．8％、42， 5rnl离心管中，55℃消化1h后改置95℃灭活lOmin，15 1％、15|8％和26．3％。2株Pa未检出修饰酶基因。 rain离。t；-5min。上清液作PCR模板液。4．P