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中国青年农业科学学术年报
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9 总结
综上所述，分离果树基因所应采取的方法和策略因具体情况不同而不同。本文所提及的方法及其适
用情况可概括如下:
要分离的基因 它的序列在植物 同种果树上
是已知的吗? 上有报道吗? 有报道吗?
队 1 曰 卜
去 *
与发育阶段或 它编码的蛋白 PCR分离片段，再结合RACE/
处理有关吗? 质能纯化吗? 不平衡PCR/文库筛选分离全长
· !
.
.
.
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.
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.
1N
.
N . . . . . 圆 圈 根据该墓因所涉及的生理过
程，试采用差异克隆法
}与dRn种}_ 是采用导人转座子或T- 用转座子/T-DNA
1差异有关吗?! DNA造成突变的吗? 标签法
1N _ 1N
视具体情况再定，可采用侧序克 进行基因定位或寻找连锁的
隆法随机获得全部或部分基因 分子标记，用定位克隆法
目前国内分离果树基因基本上均采用简单的PCR法，这样只能获得前人已获得的基因，如果同种
果树上未见报道，通过简单的PCR只能获得基因片段。笔者采用PCR筛选文库法成功地从柑橘基因组
DNA文库中分离出多个全长基因。采用PCR结合文库筛选法/RACE/不平衡PCR法、功能克隆法以及
差异克隆法分离果树基因的条件基本成熟，但现仍未见基因得到分离的报道 (在一年生作物上已有报
道)。相对而言，采用定位克隆法、转座子/T-DNA标签法以及测序克隆法分离果树基因的技术难度较
大，条件较不成熟。
第一作者简介 徐昌杰，男，1972年9月出生。1993年毕业于华南农业大学生物系，获学士学位，
1999年3月毕业于浙江大学，获果树学博士学位。随后留系任教，2002年1月升职为副教授，同年3
月获得硕士生导师资格。主要从事果实发育分子生理学研究，已发表论文43篇，在GenBank中登记基
因20个，主持国家自然科学墓金和浙江省自然科学墓金各一项。联系地址:浙江大学华家池校区园艺
系;邮编:310029;电话:0571Email:cjxu@163.neto
茶树杂交品系DNA提取与RAPD扩增研究
季鹤章 ‘那 波2 张 俊，王平盛 ‘包云秀 ‘
(’云南省农业科学院茶叶研究所;2云南省农业科学院生物技术研究所，助海 666201)
摘 要 应用修改的SD-S一一异丙醉法对42个茶树杂交品系进行总DNA提取，琼脂据凝
313 人
函2002
胶电泳，在260/280mn处紫外分光光度计分析。DNA的得率为100-2
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