组织工程细胞膜片的获取方式.pdfVIP

口腔生物医学 2014年 9月 (第 5卷第 3期) OralBiomedicine，Vo1．5，No．3，Sep．2014 [文章编号] 1674—8603(2014)03—0147—05 · 综 述 · 组织工程细胞膜片的获取方式 张 宁，林 军 (浙江大学附属第一医院 口腔科 ，浙江 杭州310006) [摘要] 细胞膜片组织工程是一种新 的细胞疗法 ，能制作 出有活性 的可移植 的细胞膜片并应用于组织工程 。本文介绍 了不 同反应性系统如温度反应性系统、电反应性系统、光反应性系统、pH反应性系统、磁系统的细胞膜片形成机制、制作方式 以及 应用 。这些系统将有助于实现细胞膜片 的大量获取和复杂组织的重建 。 [关键词] 细胞膜片 ；组织工程 ；反应性系统 ；细胞膜片脱离 [中图分类号] R329．29 [文献标识码] A [doi] 10．3969／j．issn．1674—8603．2014．03．008 组织工程通过在体外构建有生物活性的植入体 溶液温度为 32℃。温度高于 32cI=时 ，pNIPAAm呈 修复组织缺损 ，常用 的植人体是细胞与可降解生物 疏水状态，细胞可生长于其表面 ；温度低于32℃时， 支架材料的复合体。为了提高植入体与组织的生物 pNIPAAm呈亲水状态 ，细胞脱离 …。pNIPAAm本 相容性 ，相 关 学 者 提 出细 胞 膜 片技 术 (cellsheet 身的机械强度很差 ，需接枝在力学性能较好 的其他 technology，CST)。细胞膜片技术在不使用胰蛋 白酶 聚合物基材上以扩大应用范 围。此外 ，温度敏感性 的情况下获取完整的细胞膜片 ，可直接植入受区位 聚合物聚N．乙烯基 己内酰胺 (poly(N—vinylcaprolac— 点，也可叠加或与支架结合形成三维结构 ，实现组织 tam)，PNVCL)也可用于制作温度反应性表面 ¨ 。 重建。该技术最大 的优势在于能保 留细胞 间的连 温度反应性系统细胞膜片 的制作方法包括 ：电子束 接、细胞表面蛋 白以及细胞外基质 ¨ 。Haraguchi 辐照、等离子体气相聚合、紫外线照射 、溶剂浇铸法 、 等 用温度反应性培养皿经简单 的温度变化获取 旋转涂布法 、启动化学气相沉积等。 了心肌细胞膜片 ，细胞膜片叠加后可产生搏动。心 1．1 电子束辐照 肌细胞膜片应用于心肌修复时比细胞注射技术有更 最常用 的方式是通过 电子束辐照使 pNIPAAm 高的细胞存活率和移植成功率 。细胞膜 片技术 单体聚合后接枝于组织培养用聚苯乙烯培养皿 (tis— 也可应用于其他疾病的治疗 ，如 自体 口腔黏膜上皮 sueculturepolystyrene，TCPS)表面。含 pNIPAAm单 细胞的细胞膜片可用于治疗食管溃疡 ，细胞外基质 体 的异丙醇溶液均匀覆盖于 TCPS表面 ，0．3MGy 的存在使细胞膜片与溃疡面紧密连接 。此外 ，细 的电子束辐照后用去离子水洗去未接枝的NIPAAm 胞膜 片还可用于治疗肺漏气 、牙周炎 、糖尿 单体 。pNIPAAm层 的厚度影 响细胞 附着 ，薄 的 [(15．5±7．2)llm]低密度 pNIPAAm 比厚的[(29．3 病 等。因此 ，细胞膜片技术在再生医学领域有很 ±8．4)nm]高密度 pNIPAAm更有利于细胞 附着和 好的发展前景 。 目前 ，细胞膜片主要通过温度反应性系统获取 ， 脱离 ，pNIPAAm最佳厚度约20nm 。这种培养皿 已用于制作角质细胞、角膜和 口腔黏膜上皮