氮甲基哌嗪类药物和DNA相互作用的电化学研究.pdfVIP

—— 坌堑垡兰塑壁塾妻垫些 一 氮甲基哌嗪类药物与DNA相互作用的电化学研究 王素芬彭图治 (浙江大学化学系西溪校区杭州3 10028) 关键词氮甲基碾嗪类DNA相互作用 DNA与药物分子间的相互作用研究，在药物设计与合成、药物筛选及药物作用机理研究方 面具有重要意义。DNA测序技术的进展更给药物与DNA相互作用的研究带来了飞跃。目前， 已有许多方法和技术披引入此相互作用的研究。主要的有序列凝胶电泳、足印迹分析技术、光谱 法和电化学方法。其中@#1--可见吸收光谱法是研究DNA与药物分子相互作用的一种最方便、 最常用、应用也最广泛的方法。电化学方法具有简便、可靠、DNA用量少等优点．特别对于那 些吸收光谱比较弱，或由于其电子跃迁谱带与DNA发生重叠而无法用紫外．可见等方法来研究 的分子，却有可能用直接或间接伏安法方便地进行研究【1I，此外，更有价值的是采用表面电化学 方法可获得药物与DNA相互作用的热力学和动力学参数，从而使对药物与DNA相互作用的认 识达到分子水平。 哌嗪衍生物，是Hoechst药物公司开发的具有潜在临床应用价值的系列产品之一。它是一种特效 驱虫剂。然而，该化合物的主要用途是作为体内体外细胞DNA的荧光着色剂(抗生素染料)。 它与染色体形成的明亮荧光络合物显示了该染料对A-T富集区具有明显的络合选择性吲。为了从 本质上揭示其络合特性，本文报道了PBBP与DNA相互作用的循环伏安法研究。 1实验部分 实验采用以玻炭电极为工作电极的三电极体系，参比电极为饱和Ag-Agcl电极．对电极为 铂丝L邑极。屯化学测定在0．2mol几KCl溶液中进行，所用的电化学系统为BAs_100B／W。实验 温度为20℃。实验所用DNA为鱼精DNA(Sigma公司)。 2结果与讨论 v～1．0 PBBP在玻炭电极上0 V电位范围内出现两个明显的不可逆氧化峰。当扫描速 率为100mV／s，浓度为2×】04mOVE时，峰电位分别为+0．60v和+o．83v。电极用乙腈清洗得 到良好的重现性。在过量DNA存在下，原来的两个氧化峰都明显下降，峰电位负移：同样在 氧化峰的显著变化并非由DNA的加入带来的溶液粘度等物理性质的变化所致．而是DNA与PBBP 形成了络台物。为了研究药物与DNA作用的热力学和动力学过程．我们在前人工作的基础上推 导了药物在电极上反应的氧化还原电流方程。 度的核苷酸磷酸浓度CNp(mo№m3)存在如下函数关系pI： (1) 一竺二兰竺兰t ”’ “2———1i—一 ——坌堑些兰塑些塾量垫皇 其中： 6：I+Kc．+垃 ’ 25 这里，正为微观络台平衡常数(c一／t001)，s为键台位点数。 对于循环伏安实验，当溶液中存在DNA时．阳极总电流可表示为： k=口(Drt％f手Dbl7‰j (2) 这里．口为一个与浓度无关的适当值，在25℃下，对不可逆波 胆2．99×105耐an)mAv“ 式中A电极面积(cm2)； n屯子转移数；P扫描速度(v^。c)；D游离药物扩散系数(cm2ts) —般情况下口=0．5) (3) 。=B[。；。q+c。r一叫。，!宰2Kgc．～! 对于特定药物在特定实