miRNA-192对非小细胞肺癌A549DDP细胞顺铂耐药性的影响.pdfVIP

圭 生鱼 筮 卷第6期 ChineseClinicalOncolo~．Jun．2014。Vo1．19．N0．6 ·481· · 论 著 · miRNA一192对非小细胞肺癌 A549／DDP细胞 顺铂耐药性的影响 210011 南京 南京医科大学第二附属医院肿瘤科 杨育才，刘 晶，万 里，刘凤珍，王 鹤，王朝霞 摘【 要】 目的 探讨抑制microRNA一192(miR一192)在非小细胞肺癌A549／DDP细胞对顺铂(DDP)耐药性方面的影响 及可能机制。方法 通过实时荧光定量PCR(qRT—PCR)法检测人肺腺癌耐DDP细胞株 A549／DDP及其亲本细胞株A549细 胞中miR-192的表达水平 ，A549／DDP细胞转染 miR-192抑制剂(inhibitor)和miR一阴性对照(NC)48h后采用qRT．PCR检测转 染效率，分别采用 MTr法 、克隆形成实验及流式细胞术检测转染48h后A549／DDP细胞对DDP的药物敏感性、细胞增殖能力 及细胞凋亡变化，Westernblotting检测转染 48h后细胞中Bax和Bcl一2的表达变化。结果 miR．192在A549／DDP细胞中的表 达水平高于A549细胞 (P0．05)；转染 miR一192inhibitor48h后的A549／DDP细胞 miR一192水平低于转染 miR—NC者(P 0．05)；转染miR一192inhibitor后 ，A549／DDP细胞的增殖能力减弱、凋亡细胞增多、DDP对其半数抑制浓度降低、Bax蛋白水平 升高和Bcl一2蛋白水平下降，与转染 miR—NC者 比较，差异均有统计学意义(P0．05)。结论 抑制 miR．192能够降低 A549／ DDP细胞对DDP的耐药性，其作用机制可能是通过增加细胞凋亡以及下调Bc1．2蛋白和上调Bax蛋白表达来实现的。 【关键词】 非小细胞肺癌； miR一192；顺铂；耐药性 中图分类号：R734．2 文献标识码：A 文章编号：1009-0460(2014)06-0481—05 ImpactofmiRNA-192forcisplatin resistanceofnon-smallcelllungcancerA549／DDP cells YANGYucai， Jing， ⅣLi，LIUFengzhen，WANGHe，WANGZhaoxia．DepartmentofOncology，the SecondAj~liatedHospitalofNanjingMedicalUniversity，Ⅳn ng210011，China Correspond ingauthor：WANGZhaoxia，E—mail：zhaoxiawang88@hotmail．con A【bstract】 0bjective ToexploretheeffectofmicroRNA一192(miR一192)inenhancingcisplatin(DDP)resistnaceofnon— smallcelllung(NSCLC)A549／DDPcelllineandelucidateitsrelatedmechanism．Methods Thereal—timequantitativePCR(qRT— PCR)wasusedtodetectmiR一192expressioninA549cellsnadA549／DDPcells．TheA549／DDPcellsweretransfectedwithmiR-192 inhibitorormiR—negativecontrol(NC)andqRT—PCRwasusedtotestthetransfeetionefficiency．DrugsensitivitytoDDP48hafter trnasfectionwastestedbyMTI?assay．Colonyformationassaywas,usedtodetecttheproliferationofA549／DDP