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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会论文集
新型猪瘟疫苗的研究进展
郭 慧,孟繁星,徐浩,胡桂学+
(吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118)
swine 步检验结果显示,这种E2疫苗和配套的诊断试验具有较
猪瘟(classicalfever,CSF)是由猪瘟病毒(classical
swinefever
virus,CSFV)引起的猪的急性、热性、高度接好的效果。张文杰等【4】采用与国外相同的杆状病毒一昆虫
触性传染病,严重危害养猪业。目前用来防治猪瘟的疫苗 细胞技术路线取得成功。2009年台湾研究者利用巴斯德毕
主要是中国猪瘟兔化弱毒疫苗、日本GPE。疫苗和法国 赤酵母系统成功的表达重组E2蛋白,并在其后的动物试
Thireval疫苗川。在我国,猪瘟弱毒疫苗的应用一定程度上验中也取得成功【5】。另外,E2蛋白上的中和表位在猪瘟病
控制了该病的暴发与流行,但是目前尚没有方法可以区别 毒毒株中是保守的【6】,因此在E2蛋白基础上开发的亚单位
猪瘟疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,猪瘟的隐性感染和散 疫苗不仅具有对抗CSFV野毒株的广泛保护作用,而且很
发仍然严重影响我国养猪业。因此,现有的传统疫苗已不 容易通过检测抗Ems的抗体将免疫的和感染的猪区分开用,
能适应新形势的需要,研究和开发新型猪瘟疫苗是未来研 并可以根据流行毒株的变化更换合适的CSFVE2基因以规
究的方向。近年来,分子生物学技术的迅速兴起和发展, 模化生产,因而具有广阔的应用前景。
为新型猪瘟疫苗的研究和开发奠定了基础。 亚单位疫苗虽然具有良好的个体保护效果,但其接种
动物血清中的E2抗体滴度上升较慢,也不能阻止CSFV
1亚单位疫苗 的水平传播㈣。另外,接种动物血清中的Eros抗体在接种
后短时间内无法达到可检水平,这为配套的抗体鉴别检测
亚单位疫苗(subunitvaccine)是将编码病原微生物的保造成了很大的局限。目前,国内外许多机构正在研究改进
护性抗原基因导入受体菌或细胞,使其在受体中高效表达
保护性抗原蛋白,将此抗原蛋白与佐剂联合制成的一类疫 了一定的进展。
苗。亚单位疫苗是病毒粒子的一部分,不含核酸,具有良
好的安全性和稳定性,但亚单位疫苗的免疫原性通常较 2合成肽疫苗
低,需要与佐剂联合使用,或偶联到适当的载体上应用。
CSFV编码的E2和E0蛋白是其主要保护性抗原,均能独利用DNA重组技术,根据CSFV基因组的核苷酸序
立诱导机体产生中和抗体,保护机体免受强毒攻击。E2 列,可推导出CSFV蛋白质的氨基酸序列,从而可用人工
亚单位疫苗是最早投入使用也是目前惟一投入使用的猪瘟 合成方法制备其主要抗原相应的寡肽,制备猪瘟合成肽疫
标记疫苗。
荷兰学者Hulist等[2】将CSFVE2基因与核型多角体病 777位氨基酸,偶联BSA制成合成肽苗,结果免疫猪能产
生高滴度的抗体,并能完全保护强毒的攻击。以此多肽制
毒(AcNPV)重组,并在昆虫细胞Sf21中成功表达,免疫
备高免血清,此血清l:4和1:6稀释后能抑制C株的兔体
20ug表达的E2蛋白可以保护被免疫猪免受强毒的攻击。
目前,该蛋白的表达水平已经提高到60ug/mL,并且该疫热反应,而用合成多肽对高免血清进行亲和层析处理后,
苗在1998年被列入欧洲药典。MoormannRJ等嘲已分别在 则不能抑制C株的兔体热反应。
克隆的猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2和E“的基础上,尝试开发 许多研究结果表明,猪瘟合成肽疫苗免疫后所起的免
出了猪瘟的亚单位标记疫苗及与之相配套的诊断试验。初
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