高产L-赖氨酸发酵工艺优化研究.pdfVIP

l匿_匦 ]旦塑旦夔 在水产饲料领域里L一赖氨酸是重要 的饲料添加 0．1％、0．12％的玉米浆添加量 (质量／体积)进行单因素 剂，添加赖氨酸能强化饲料蛋白质的营养价值，大大 发酵试验，确定最佳的玉米浆添加量。 提高养殖效果，对维持水生动物的正常生长、发育和 (3)发酵毛发水解液添加量 的确定。在发酵培养 神经系统的正常机能具有非常重要的作用。饲料中缺 基 的基础上 ，分别添加 0．01％、0．02％、0．03％、 乏赖氨酸会造成负氮作用 (蛋白质分解并被排出)，使 0．04％、0．05％、0．06％的毛发水解液 (质量 ／体积)进行 饲料中蛋白质不能充分利用，水生动物生长缓慢，还 单因素发酵试验，确定最佳的毛发水解液添加量。 会出现脂肪肝、骨质钙化率降低等症状。本文对影响 6．正交试验 在单因素试验的基础上，采用三因 L一赖氨酸发酵的条件包括接种量、玉米浆添加量、毛 素三水平的正交设计法，以接种量、玉米浆添加量、 发水解液添加量等因素进行初步研究，以寻求最优的 毛发水解液添加量为考察因素，以L一赖氨酸的产量 L一赖氨酸发酵工艺，达到缩短发酵周期 、降低能耗、 (克／升)为指标进行发酵优化试验。 提高糖酸转化率及赖氨酸产量的目的。 二、结果与分析 一 、 材料与方法 1．单因素试验 1．菌种 产赖氨酸大肠杆菌，由丰原发酵技术国 (1)不同接种量对L一赖氨酸发酵的影响。不同接 家工程研究中心菌种室提供。 种量对L～赖氨酸发酵的影响不同，接种量 14％～18％ 2．培养基 斜面培养基 (克／升)：葡萄糖2．3， 时，L一赖氨酸产量相对较高，其中接种量 16％时，L一 硫酸铵 5，酵母膏5，牛 肉膏2，蛋 白胨0．8，琼脂 赖氨酸产量最高，为 183克 ／升 ，随着接种量的增 20，氯化钠2．0，碳酸钙0．02；pH6．5～6．7。 加，L一赖氨酸产量下降明显，因此 ，选择 14％～18％ 种子培养基 (克／升)：葡萄糖25，硫酸铵5，磷 接种量进行后续正交优化试验。 酸二氢钾 3，硫酸锰 0．04，硫酸镁0．9，硫酸亚铁 (2)不 同玉米浆添加量对L一赖氨酸发酵的影响。 0．03，酵母浸粉8；pH6．5～6．7。 不同玉米浆添加量对L一赖氨酸发酵的影响不同，随 发酵培养基 (克／升)：葡萄糖20，硫酸铵 l2，磷 着玉米浆添加量的增加，赖氨酸产量呈上升趋势，但 酸二氢钾 1．3，硫酸镁0．3，硫酸亚铁0．O1，硫酸锰 玉米浆添加超过一定量，赖氨酸产量呈下降趋势，综 O．01，硫酸锌0．001，酵母浸粉；生物素 150微克 ， 合考虑，选择玉米浆添加量0．04％~0．08％进行后续 维生素B13毫克，苏氨酸18毫克，pH6．6～6．7，接 正交优化试验。 种量 12％，发酵周期40小时。 (3)不同毛发水解液添加量对L一赖氨酸发酵的影 3．培养条件 种子培养 ：温度 36℃、罐压 响。毛发水解液添加量0．03％时，L～赖氨酸产量最 0．05兆帕、风量 550升／小时、转速 300转 ／分钟，用 高，毛发水解液添加量0．02％~0．04％时，L一赖氨酸 氨水调pH至6．7，溶氧控制在20％~40％，调节罐压、 发酵产量较高，因此，选择0．02％~0．04％的毛发水 风量、转速控制溶氧，优先提高转速。 解液添加量进行后续正交优化试验。 4．发酵培养 50升发酵罐，温度36℃、罐压 2．正交试验 通过正交试验可以看出，培养条件 0．05兆帕，风量500升／时，转速300转／分 ，用氨水 对L一赖氨酸发酵的影响大小顺序是：接种量 (％)