活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变的影响研究.pdfVIP

· 专 题 研 究 · 活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变的影响研究 何 洁，郝改梅，武志黔，韩 静，吴 晏，薛晓兴，李玉波，王 伟 【摘要】 目的 观察活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子一 (TGF一 )、Smad2及基质金属蛋白 酶9 (MMP一9)、基质金属蛋白酶2(MMP一2)、Ⅳ型胶原表达的影响，从TGF一31／Smads信号转导通路调控基质代 谢的角度探讨活血解毒方改善糖尿病大鼠视网膜病变的可能作用机制。方法 SPF级雄性sD大鼠12只，大鼠适应性 喂养 1周后，按照随机数字表法选取8只大鼠以65mg／kg的剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)，诱导糖尿病模 型。剩余4只作为正常组注射等量的柠檬酸钠溶液。1周后尾静脉采血检测血糖，以禁食 12h血糖 ≥16．7mmol／L为糖 尿病模型造模成功。将8只糖尿病模型大鼠按照拉丁方设计，分为模型组和活血解毒方组，各4只。活血解毒方组给 予活血解毒方7．7Og／kg，1次／d，正常组和模型组予以等体积纯净水，持续 16周。采用Real—timePCR法检测大鼠视 网膜中TGF—B2mRNA及Smad2mRNA的表达；Westernblotting检测MMP一9、MMP一2蛋白的表达；免疫组织化学法 检测Ⅳ型胶原的表达。结果 3组大鼠视网膜中TGF—B：mRNA、Smad2mRNA表达比较，差异均有统计学意义 (F= 6．232，P=0．034；F=9．518，P=0．014)，其中模型组和活血解毒方组视网膜中TGF—p2mRNA、Smad2mRNA表达 水平均高于正常组；活血解毒方组视网膜中TGF—BmRNA、Smad2mRNA表达水平均低于模型组 (P0．05)。3组大 鼠视网膜中MMP一9、MMP一2蛋白表达比较，差异均有统计学意义 (F=17．387，P=O．001；F=8．593，P：0．008)， 其中模型组和活血解毒方组视网膜中MMP一9、MMP一2蛋 白表达均高于正常组 (P0．05)；活血解毒方组视网膜中 MMP一9、MMP一2蛋白表达均低于模型组 (P0．05)。正常组大鼠视网膜中Ⅳ型胶原表达低 ，呈淡棕色 ；模型组：视 网膜Ⅳ型胶原表达升高，呈深棕褐色；活血解毒方组 ：视网膜Ⅳ型胶原表达呈淡褐色，较模型组表达降低。结论 活 血解毒方可能通过下调TGF一8mRNA及 Smad2mRNA的表达，干预 TGF一31／Smads信号转导通路调控基质代谢，使 MMP一9、MMP一2、IV型胶原的表达下调，从而改善糖尿病视网膜病变。 【关键词】 糖尿病视网膜病变；活血解毒方；TGF—B／Smads信号转导通路；基质代谢 【中图分类号】R587．26 【文献标识码】A doi：10．3969／j．issn．1007—9572．2015．05．006 何洁，郝改梅，武志黔，等．活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变的影响研究 [J]．中国全科医学，2015，18 (5)：507—512．[www．chinagp．net] HeJ，HaoGM，WuZQ，eta1．Effectsofhuoxuejiedurecipeonretinopathyindiabeticrats[J]．ChineseGeneral Practice，2015，18(5)：507—512． EffectsofHuoxueJieduRecipeonRetinopathyinDiabeticRats HEJie，HAO Gai—mei，WUZhi—qian，eta1．Basic MedicalCollege，BengUniversityofChineseMedicine，Beijing100029，China 【Abstract】 Objective ToobservetheeffectsofHuoxueJieduRecipe (HJR)onTGF～B2，Smad2，MMP一9， MMP一2，andcollagenVI indiabeticratswithretinatoexplorepossiblemechanismofHJRinimprovingretinopathyofdiabetic ratsthroughTGF一31／Smadssignaltransductionpathwaysregulatingmatrixmetabolism．Methods 12SPFmaleSDratswere enrolledint