油菜野芥NSa细胞质雄性不育系的特异性分子鉴定.pdfVIP

作物学报 ACTAAGRONOMICA SINICA 2008，34(11)：1946-1952 http：／／www．chinacrops．org／zwxb／ ISSN0496—3490；CODENTSHPA9 E—mail：xbzw@chinajourna1．net．cn DoI：10．3724／SP．J．1006．2008．01946 油菜野芥NSa细胞质雄性不育系的特异性分子鉴定 程计华L2 李云昌 胡 琼 ， 梅德圣 李英德 徐育松 王巍敏 (中国农业科学院油料作物研究所国家油料作物改 良中心，农业部油料作物遗传改 良重点实验室，湖北武汉 430062； 华中农业大学 植物科技学院，湖北武汉 430070) 摘 要：常规细胞质类型鉴定方法花费时间长、工作量大、鉴定效率低 、应用性较差 。基于基因组重复序列的PCR 技术(rep—PCR)在重复序列丰富的线粒体和原核生物 的基因组鉴定中效果较好，本研究对 8份油菜资源的细胞质进行 分子鉴定，结果表明 rep—PCR可以明确区分甘蓝型油菜中常见的 6种雄性不育细胞质。同时对甘蓝型油菜和野芥 (Sinapisarvensis)体细胞杂交创建的、育性较为稳定的NSa野芥雄性不育胞质进行了分子特异性鉴定，获得了 2条 NSa不育胞质的特征DNA条带。但波里马和萝 卜质不育细胞质的特异性引物在NSa中不能扩增出特异性片段，说 明 NSa不属于这 2种细胞质类型。本研究结果为该不育胞质系统的利用和知识产权保护提供 了理论依据和技术支撑 。 关键词：油菜；异源细胞质雄性不育；分子特异性；重复序列 PCR M olecularIdentificationandDistinctnessofNSaMaleSterileCytoplasm inBrassicanapus CHENG Ji—Hua，。 ， LIYun—Chang，HU Qiong，，MEIDe—Sheng ，LIYing—De，XU Yu—Song，and WANG W ei—M in fNationalCenterforOilCropsImprovement，KeyLaboratoryofAgriculturalMinistry forOilCropsImprovement，OilCropsResearchInstitute， ChineseAcademyofAgriculturalSciences，W uhan430062，Hubei；。CollegeofPlantScience HuazhongAgricultural University，Wuhna 430070， ， Hubei，China) Abstract：Cytoplasmicmalesterility(CMS)hasbeenwidelyusedasanefficientpollinationcontrolsysteminrapeseed(Brassica napus)hybridproduction．WithhteexploitationofwildspeciesofCruciferandtheapplicationofbiotechnology,severalcyto— plasmicmalesterilesystemsofoilseedrapehavebeenreportedinrecentyears．Traditionalmehtodsusedforhteidentificationof cytoplasm，however,raetimeandlaborconsumingwithlow efficiency~Thus，itishighlydesirabletodevelopna efficientand accurateidentificationmethodofrcytoplasm classification．Repetitivesequencebasedpolymerasechainreaction(rep—PCR)has provedtobeagoodmehtodforhteidentificatio