黄芪水煎液诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞增殖以及分泌IFN-γ的研究.pdfVIP

动物医学进展 ，2015，36(3)：50-53 ProgressinVeterinaryMedicine 黄芪水煎液诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞 增殖 以及分泌 IFN～，)，的研究 张 磊。，孙 静 ，张 涛。，董 虹 ，杨佐君 ，穆 祥 ，胡 格 卜 (1．北京农学院动物科技学院，北京 102206；2．兽医学(中医药)北京市重点实验室，北京 102206； 2．天津出入境检验检疫局新港办事处，天津 300457；4．北京动物园，北京 100044) 摘 要：为了探讨黄芪水煎液能否诱导大鼠肠黏膜微血管内皮细胞 (RIMVECs)表达 IFN一了，采用MTT 和双夹心ELISA分别检测 了黄芪水煎液对体外培养的RIMMVECs增殖以及表达 IFN一7的影响。结果显 示，黄芪水煎液在 25mg／L~3200mg／L时促进 RIMVECs增殖。为更好的研 究黄 芪水煎液诱导效果，将 不 同浓度的黄芪水煎液(0．1、1、6、30mg／mL)诱导 RIMVECs6、12、24h检测 IFN一 含量，结果显示 ，在各 ,k2-~,l时间点 0．1、1mg／mL组和空 白组差异显著 (P0．05)，6mg／mL组差异极显著 (P0．01)，3Omg／mL 组差异不显著 (P0．05)。说明黄芪水煎液的抗病毒作用可能与诱导微血管 内皮细胞表达 IFN一 有直接 的 关系，为黄芪 “益气解毒”功效的现代 阐释提供 了试验依据 。 关键词 ：黄芪；微血管内皮细胞 ；干扰素；大鼠 中图分类号 ：$853．74；$852．33 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—5038(2015)03—0050—04 目前 ，畜禽病毒病严重威胁着养殖业以及人类健 找药物诱导具有合成 IF 了潜能的细胞分泌 IFN一7 康 。而针对该类疾病的特效药的种类却十分有限，而 一 直是研究的热点，也对病毒性疾病的防控具有重要 仅有的几种抗病毒西药还有较为严重的毒副作用和 的意义 。 兽药残留问题[1]。而黄芪对这些病毒病有较好的疗 穆祥 认为经络 的实质是有序态 的微血管 网 效 ，且几乎无毒副作用 ，也不存在兽药残留的问题 ，因 络 ，这就意味着黄芪的作用靶 点应该是微血管内皮 而其具有更为广阔的市场前景。从中医的角度看 ，黄 细胞 (MVECs)。因此 ，本试验选取黄芪作为干扰素 芪抗病毒作用可以看作是其 “益气解毒”功效的体现， 的诱导剂 ，研究黄芪水煎液对于大鼠肠黏膜微血管 且黄芪作为大补脾肺之气 ，多认为与免疫系统密切相 内皮细胞 (RIMVECs)中了一干扰素表达有何影响，从 关 ，内源性干扰素作为机体抗病毒的主要内在环节之 而为解释黄芪的抗病毒作用机理提供试验依据。 一 ，是 “内因”，故 以内源性干扰素诱生为着 眼点和切 1 材料与方法 入点，深入研究黄芪 的抗病毒作用 ，可为其 “益气解 1．1 材料 毒”功效的现代阐释起到积极的作用l2]。目前 国内外 1．1．1 主要仪器 96孔酶标仪 ，美国Thermo公 司 研究报道，能诱生 IFN 的中药、中药成分及制剂有黄 产品；洗板机 ，北京拓普分析仪器有 限公司产品；冷 芪、刺五加多糖、香菇多糖 、茯苓多糖、人参、栀枝黄注 冻高速离心机，德 国Eppendor{公司产品；细胞培养 射液 等多种。 板 ，美国Costar公司产品。 干扰素 (IFN一)是一种具有多重生物学功能的 1．1．2 主要试剂 大鼠IFN一丫检测试剂盒 ，深圳晶 免疫活性蛋白，是一种重要的细胞功能调节因子 ，具 美生物工程公司产 品；噻唑蓝 (MTT)、兔抗人第Ⅷ 有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等功能4【]，是一类重要 因子相关抗原抗血清 ，美国Sigma公司产 品；二甲基 的免疫分子，其研究正 日益受到重视。IFN-7属诱生 亚砜 (DMSO