小麦八氢番茄红素合成酶基因的克隆和序列分析.pdfVIP

河南农业科学，2014，43(12)：15—18，33 JournalofHenanAgriculturalSciences 小麦八氢番茄红素合成酶基因的克隆和序列分析 刘慧娟 ，冯志国 ，董 瑶 ，汤贞贞 ，何光源 (1．信阳师范学院 生命科学学院，河南 信阳 464000；2．华中科技大学 分子生物物理教育部重点实验室，湖北 武汉 430074) 摘要 ：为了探讨 小麦 中类胡萝 卜素的合成机制 ，通过 RACE方法 (rapidamplificationofcDNA ends)从小麦 中克隆到 1个新的八氢番茄红素合成酶 (PSY)基 因，用 DNAMAN软件对 PSY基 因 序列进行分析并构建了系统进化树 。结果表 明，该基因cDNA序列长为 1151bp，编码304个氨基 酸，分子量为 33．9kD。小麦的PSY基 因与其他植物 PSY基 因高度 同源，相似性为 60％～92％， 其中与水稻、玉米中PSy2的同源性高达 90 以上 ，系统进化树分析表 明，PSY基因在植物进化上 是高度保守的。软件分析表 明，克隆的PSY基 因属于 P5y2群，将该基 因命名为 TaPSY2。 关键词 ：八氢番茄红素合成酶基 因；小麦；cDNA 末端快速克隆 ；序列分析 中图分类号 ：S512．1 文献标志码：A 文章编号：1004—3268(2014)12—0015—05 CloningandSequenceAnalysisofW heatPhytoeneSynthaseGene LIU Hui—juan～，FENGZhi—guo ，DONGYao，TANG Zhen—zhen，HEGuang—yuan (1．CollegeofLifeSciences，XinyangNormalUniversity，Xinyang464000。China： 2．KeyLaboratoryofMolecularBiophysicsofMinistryofEducation．HuazhongUniversityofScienceand Technology(HUST)，W uhan430074，China) Abstraet：Inordertounderstandthesynthesismechanism ofcarotenoidsinwheat，anew phytoene synthase(PSY) genewascloned from wheatby RACE．ThePSY genewasanalyzed and a phylogenetictreewasconstructedbyDNAMAN．Theresultsshowed thatthegenecDNA was 1151bpinlengthandencodedapolypeptideof304animoacidswithacalculatedmolecularmass of33．9kD．A BLAST searchin GenBank showedthatwheatPSY washighly similartothatin otherplants(60 一 92 )．Especially，theidentityofthewheatPSY genewithPSY2 genesin riceandmaizewasover90 ．Phylogenicanalysisshowed thatPSY washighlyconservativein evolutionofplants．MotifanalysisshowedthattheclonedgenebelongedtoPSY2 group，which wasdesignatedasTaPSY2． Keywords：phytoenesynthasegene；wheat；RACE；sequenceanalysis 类胡萝 卜素的生物合成一直是植物次生代谢基 成酶 (PSY，phytoenesynthase)是类 胡萝 卜素合成 因工程研究中的一个重要课题 ，其生物合成途径 已 途径中的一个关键酶，它将 2个 C20化合物香 叶基 比较清楚 。类胡萝 卜素多为