红细胞作载体抗氧化酶用于脑缺血再灌注损伤实验研究.pdfVIP

鱼兰霉胞作载体的擅氧化酶用于脑缺 血再灌注损伤的实验研究 张永富、*王学琦、*朱明娟 王秀英、张硫芬、张海玲 中国医学科学院中国协和医科大学生物医学工程研究所 天津南开区科研东路7号300192 摘要： 研究采用红细胞(RBC)作为超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘 肽过氧化物酶(GSH·PX)的载体的可行性，并将这些载体RBC用于兔、沙士 鼠脑缺血再灌注损伤研究。观察自由基浓度、MDA及超微结构改变。结果 保护微血管正常形态和流态，保护神经细胞，可有效减轻脑缺血再灌注损 伤。 一、序言 超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH·Px)和过氧化氢酶 (CAT)是体内重要的抗氧化酶、在清除过量的活性氧．减轻缺血一再灌注(I —R)损伤，抗炎等方面发挥着重要作用，是有广泛应用前景的药用酶，但它 们的游离形式在血液循环中的半衰期很短，只有几分种至十几分钟，因而其 应用受到限制。目前延长SOD半衰期采用分子工程的方法，半衰期可延长 至几十个小时，或将SOD包入脂质体，但脂质体易集中到脾、肝和肺组织。 我们将抗氧化酶用红细胞作载体，已证明在体内半衰期可显著延长，对脑缺 血再灌损伤有较好的防治效果。 二、实验方法和结果 (一)实验方法： 动物：大耳白兔分四组，假手术组，腑缺m再灌组，脑缺血再灌给SOD 一269．一 或CSH·Px组，脑缺廊再灌给RBC—SOD或RBC—GSH·Px组。 方法：采用低渗透析法将SOD和GSH·Px装进RBC，测量装入量和载 体RBC在兔体内的循环半寿期。 实验动物结札右椎动脉，用动脉夹阻断双测颈总动脉60分钟，松开动 脉夹再灌注120分钟造成不完垒性脑缺血再灌注损伤模型。 测定MDA，自由基浓度(ES；R法)，超微结构观察。 (二)实验结果 对照组显著降低。脑组织水份有降低趋势!但无统计学意义。 超微结构观察表明缺血再糟!损伤组毛细血管痉挛、闭塞、神经元及神经 胶质细胞退行性变、病变明显；给RBC—SOD组病变较轻，有的完全正常。 2．RBC—GSH·Px对脑缺血再涟损伤的影响：缺血再灌损伤组自由基浓 由基浓度下降，统计学差异显著{7P0．01)，低于缺血再灌组，但仍高于假手 术组。 RBC—GSH·Px组MDA有轻度降低(Po．05)。 RBC—GSH‘Px组脑组织水份降低。有统计学差异(P0．01)。 超微结构观察表明脑缺盥再灌损伤组改变较明显。徽循环障碍、水肿、 神经元及神经胶质细胞退行性受，RBC—GSH·Px组有明显改善、病变较轻。 衰期显著延长。 三、结论 (--)RBC可用作SOD和GSI{·Px的载体，可显著延长半衰期。 _r玎。 L? ≯1 一270一