马铃薯青枯病病原的鉴定.pdfVIP

马铃薯青枯病病原的鉴定——郑雪坳 ，宋波涛 ，谭晓丹 ，等 ·83· 中图分类号：$532 文献标识码：A 文章编号：1672--3635(2014)02—0083—07 马 铃 薯 青 枯 病 病 原 的鉴 定 郑雪坳，宋波涛，谭晓丹，陈惠兰 (华中农业大学园艺林学学院／华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室／ 国家蔬菜改良中心华中分中心。湖北 武汉 430070) 摘 要：利用湖北省四个地点的马铃薯青枯病样本，对其病原物的菌落形态、碳水化合物利用、显微形 态、鞭毛引物序列、演化型以及致病力等方面进行了分析。结果显示，在2，3，5一氯化三苯基四氮唑培养基上检 测得到16个病原物茵落符合青枯茵茵落形态特征 ，包括菌落圆形，隆起 ，中间红色，乳白色分泌物，并伴有褐 色物质 ；显微观察16个病原物中仅有6个病原物具有短杆状、两端钝 圆的特点；而其中能够通过PCR扩增得到鞭 毛序列的病原物仅有源 自武汉的HZ4—14和HZ5—1，序列比对发现两者序列一致且与GMIIO00等已测序青枯菌株 同源性达到99％；演化型测定结果显示HZ4—14和HZ5—1均能得到 144bp的目标条带，为演化II型；利用四种不 同马铃薯材料试管苗伤根接种鉴定结果显示两个菌株均具有一定致病力。结果表明，引起湖北省武汉市青枯病的 病原物为雷尔氏青枯茵Ralstoniasolanacearum，生理小种2号，演化II型(美洲组)。 关键词：马铃薯；青枯茵；病原鉴定 IdentificationofPotatoBacteriaIW iltPathogens ZHENGXueao，SONGBotao，TANXiaodan，CHENHuilan (CollegeofHorticultureandForestrySciences／KeyLaboratoryofHorticulturalPlantBiology(HAU)，MinistryofEducation／National CenterforVegetableImprovement(CentralChina)，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan，Hubei430070，China) Ab—融 Thecolonymorphology,carbohydrateutilization，microscopy,fliCsequence，phylotypeandpathogenicityof RalstoniasolanacearumwerestudiedbyusingthediseasedpotatofrOm fourcitiesofHubeiProvinceinordertoinvestigatethe etiologyofthediseasebacterialwilt．Sixteenstrainsexhibitedirregularround，upheaval，pinkcolonieswithwhitemargin differentiallyonBGmediumwith2,3，5-triphenyltetrazolium chloride．Sixstrainsofthem showedthetargetedmorphologyof R．solanacearum bymicroscope．Onlytwostrainshadtargetedfragments，whichwereamplifiedbythespecific C primers． Thetargetedfragmentsweresequenced．TheresultsrevealedthatHZ4-14andHZ5-1had99％ nucleotidematchingwiththe flicgeneof见solanacearumGMJ1000．TheresultsofphylotypemultiplePCRindicatedthatthespecific144bpfragments were amplifiedfr0m wtostra