濒危植物小叶朴组织培养的初步研究.pdfVIP

濒危植物小叶朴组织培养的初步研究 张丽杰1 陆秀君i周永斌木I金星2 fl沈阳农业大学林学院，辽宁沈阳110866；2．辽西生态林场，辽宁朝阳122000) 摘要：以濒危植物小叶朴带顶芽或腋芽的茎段为外植体进行离体培养，研究了消毒试剂和时间、 基本培养基、外源激素的种类和浓度、蔗糖和琼脂的浓度等对小叶朴离体培养的影响，初步建立 小叶朴离体培养体系。结果表明：小叶朴顶芽或腋芽茎段的消毒以用O．I％HgCl2处理10min效果 最好；通过对两种培养基(MS、1／2MS)和不月生长素，细胞分裂素浓度及蔗糖浓度对腋芽萌 1．0 发效果的对比，筛选腋芽离体萌发最佳组合：MS+BA mg．LJ+NAA0．5mg．L～+309．LJ蔗糖 +7．Og．L‘1琼脂，萌发率达85％。 关键词：濒危植物；小叶朴；组织培养：初步研究 性，萌蘖力强，寿命长的特点，其对病虫害、烟尘污染等抗性强，具有较高的经济价值，观赏价 值及药用价值。近年来，国内外关于榆科树种方面的研究主要集中在种质资源的研究与保存、杂 交育种及实生苗选育、种源变异、分子遗传学和非常规育种等方面[1-81。针对小叶朴的研究主要 在其种子和果实的生长发育、胚的发育及大小孢子发生和雌雄配子体的形成等方面，但关于小叶 朴组织培养方面的研究还属空白。因此，本研究主要选取小叶朴的带顶芽或腋芽的茎段为外植体 进行离体培养，初步探讨消毒试剂和时间、基本培养基、外源激素的种类和使用浓度、蔗糖和琼 脂的浓度等对小叶朴离体培养的影响，初步筛选出适合小叶朴离体培养的最适外植体、最适基本 培养基、激素的浓度和种类，建立小叶朴离体快繁体系，为大量繁殖该树种奠定基础来初步满足 园林生产上的需求。 1材料与方法 1。l植物材料 2012年3月初在沈阳农业大学植物园选取小叶朴的休眠枝，在实验室进行水培，每天换一 次水，待发出小腋芽选取带腋芽或带顶芽的茎段作为外植体。 1．2试验方法 1．2．1培养基的配制 1．0mg．L。1)，生长素NAA(0，0．025，0．05，0．5，0．1mg．L’1)，添加蔗糖浓度为20，30，40g．L～， 琼脂79．L～，pH为5．8，常规方法配制分装后，经121℃高温灭菌20min备用。 1．2．2材料消毒 将采回的休眠枝条置于室内水培，待腋芽萌发时取带腋芽或顶芽茎段，剪成长约2-3cm，每 段至少带一个芽(顶芽或腋芽)，流水冲洗2～3h，然后在超净工作台上进行消毒处理，实 验设计2种消毒试剂，采用不同消毒时间进行灭菌处理(表1)。外植体消毒后，放在事先 灭过菌的滤纸上吸干表面水分，用解剖刀切下茎段两端，把消毒过的伤口面剪掉，备用。 表1实验所用不同种类消毒试剂和消毒时间 消毒试剂 序号 种类 处理时间／s 种类 处理时间／rain 5 8 I 70*／,酒精 30s OtI％Hgcl2 10 12 5 70*／,酒精 ，。％NaC-。， 三 1．2．3培养条件 2结果与分析 2．1不同消毒剂和消毒时间对腋芽离体培养的影响 试验中将准备好的小叶朴带顶芽或腋芽的茎段按照表1的消毒试剂和消毒时间进行消毒处 理，然后将处理好的茎段接于初代基本培养基中，10d后统计外植体染菌情况，结果见表2：