免疫组织化学图像光度学参数的选择及测量.pdfVIP

局解手术学杂志 2009年第 18卷 第6期 JRegionalAnatOperativeSurg，2009，Vo1．18，No．6 · 377 · 免疫组织化学图像光度学参数的选择及测量 文 敏，周 波，余资江 (贵阳医学院人体解剖学教研室，贵州贵阳550004) [摘 要] 目的 探讨免疫组织化学图像定量分析的最佳光度学指标 ，并对其测量方法及影响因素进行分析 ，以提高图像分 析的精度。方法 运用图像分析软件，建立统一的图像采集、分割及处理标准，对青年、老年大鼠海马CA3区突触素的平均光密度、 积分光密度进行测量。结果 青年组与老年组大鼠海马CA3区突触素积分光密度较平均光密度差异性更为显著。结论 积分光 密度与平均光密度相 比将面积因素考虑在 内，测量物质含量结果更为准确。 [关键词]免疫组织化学；图像分析；光密度 [中图分类号]R392．1 [文献标识码]A [文章编号]1672—5042(2009)06-0377-02 Selectingandmeasurementofluminanceparameterbasedon immunohistochemistryimage WENMin，ZHOUBo，YUZi—jiang(DepartmentofAnatomy，GuiyangMedicalUniversity，GuiyangGuizhou550004，China) Abstract：0bjective Toevaluatethebestluminanceparametersonthequantitativeimageanalysisofimmunohistochemicalstaining， andanalyzethemethodsofmeasuringandcorrelativefactors，inordertoimprovethemeasurementprecision．Methods Unifiedpicturecol— lected，processedanddisposestandardestablishedrfom imageanalysissoftwarewereusedtomeasuretheaverageopticaldensity，integral opticaldensityofhippocampal~CA3areasynapsesforyoungandold．Results Theintegralopticaldensityof hippocampal~CA3areahad moresignificantdifferencethantheaverageopticaldensityinyoungandold．Conclusion Comparedwiththeaverageopticaldensity，inte— graloptical densityhasmuchmoreaccurateresultsaboutmeasuringthecontentofsomesubstances． Keywords：immunohistochemistry；imageanalysis；optical density 光度学参数是免疫组织化学染色图像分析中的常 称吸光度，是指光线通过溶液或物质前的入射光强度Ia与该光 用检测指标，运用计算机图像分析软件对免疫组织化 线通过后的透射光强度 Ib比值的对数。 学阳性产物着色的深浅及面积的大小进行分析，可 以 1．2 免疫组化染色准确定量分析的进程 计算出阳性产物的光度学参数值，从而达到对组织 1．2．1 采像 图像采集的条件和标准必须严格统一。开机 后预热20min，将采图的各项设置包括光源、白平衡、对比度等 (细胞)内化学物质的定性、定位和定量分析的 目的。 均改为手动调节且固定，以保证每次采图设置一致。拍照前需 然而，如何使用计算机图像分析软件对免疫组化图像 要校正灰度，将图片转换为灰度 图，测量空 白区域灰度，在220 进行准确定量分析，尽量减少人为误差，提高检测精