原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
4801 中 国 兽 医 学 报 200 8 年 9 月 第 28 卷 第 9 期 Ch in J Vet Sci Sep t . 2 00 8 V ol . 2 8 N o . 9
新生奶牛成骨细胞的体外培养 、鉴定及生物特性
1 1 3 1 ,2 1 1 1 1 , 3
李素华 ,郭定宗 ,黎 兵 ,赵 圣 ,杨世锦 ,尹红斌 , 向金梅 ( 1. 华中农业 大学 动物营养代 谢病
与畜产品品质调控研究中心 ,湖北 武汉 430070 ;2 . 深圳出入境检验检 疫局 , 深圳 5 1804 5 ;3 . 湖北省技术职业 学院 ,
湖北 武汉 4 30070)
摘要 :取新生奶牛肋骨 ,剪成 1 mm3 大小骨片 ,胰蛋 白酶消化 5 次 ,D2Han k ’s 液彻底冲洗 后 ,骨 片置于含 15 %FBS
( )
的 D M EM 中培养 ,获取单层细胞 。采用倒置显微镜下观察细胞形态 ,改 良钙2钴法染色 ,检测碱 性磷酸酶 A P 活
( )
性 、骨钙素 O C mRN A 丰度及骨钙素蛋白浓度等方法 ,对细胞进行鉴定 。通过 M T T 法 绘制 生长 曲线 ,研究细胞增
殖特性 ,茜素红染色观察细胞钙化功能 。结果显示 ,采用本法所获得的细胞 具有典型 的成骨细胞形态和特 性 : A P
染色呈阳性 ,活性水平较高;培养 7 d 后可检测到骨钙素 mRNA 表达 ,12 d 后细胞上清 液中可检测 到骨钙素蛋 白;
诱导培养 2 周后细胞可形成钙化结节 。提示采用胰 蛋白酶 消化 , 组织块 移行法所培养 的细胞具有成骨细胞特 性 。
本方法可获得高纯度 、高活性的奶牛成骨细胞 。
关键词 :成骨细胞 ;细胞培养 ;培养特性 ;奶牛
中图分类号 :S852 . 16 文献标识码 :A 文章编号 : 100 524 54 5( 2008) 09210 84204
Cult ur e , iden t if icat ion an d biol ogical character ist ic s of n e wbor n calf osteobla st
I Su2hua 1 , GU O Din g2zon g1 3 , I Bin g1 ,2 , Z HAO Shen g1 , YAN G Shi2j in1 , Y IN Hong2bi n1 , X IAN G
J i n2mei1 ,3 ( 1. Res ea r ch Cent er f or i vestock P r od ucts Q ual i t y Co nt r ol a n d A ni m al N ut r it ion
M et abol ic Dis e ase , H ua zho ng A g r icu lt u r al U niver si t y , W uh an 430 070 , Chi n a ; 2 . S henzhen E nt r y2
Ex it I ns p ecti on an d Q ua r a nti ne B ur e a u , S henzhen 518045
文档评论（0）