小胶质细胞α7-nAChR表达及意义.pdfVIP

山东医药 2008年第48卷第48期 · 论著 · 小胶质细胞 o：7-nAChR表达及意义 雷露雯 。王 勇 (南方医科大学珠江医院，广东广州510282) [摘要] 目的 观察巨噬细胞烟碱型乙酰胆碱受铎 41[一．~ChRh 钵外培养的小胶质细胞中的表达，为进一 步研究其作用提供理论依据。方法 采用 RT．PCR及细胞免疫荧光双标法，用针对 (X7一nAChRR特异性的引物进行 PCR，分析d，一nAChRR在小胶质细胞中的表达。结果 可扩增出450bp目的条带；细胞免疫荧光双标分析显示 ，小 胶质细胞抗CD。，b／c和抗 一nAChRR染色均呈阳性。结论 一nAChRR在体#l-b／胶质细胞中能正常表达 ；此可能 是小胶质细胞发挥作用的分子学基础。 【关键词] 小胶质细胞；巨噬细胞烟碱型乙酰胆碱受体；反转录一多聚酶链式反应；荧光双染 [中图分类号] R338．2 [文献标识码] A [文章编号] 1002-266x(2008)48-0001-02 Expressionandsignificationof 7-nAChRR inhippocampalmicroglialcell L酣 ￡u—weft,．WANG y0ng (ZhufiangHospital，SouthenMedicalUnversity，Guangzhou510282，P．R．China) Abstract：Objective ToinvestigatetheexpressionandsignificationofOL7nicotinicaeetyeholinereceptors(仅7一nACh· RR)inhippocampalmicroglialcells．Mehtods Expressionofc~7-nAChRR inculturedrathippocampusmicroglialcell wasnotonlybyRT—PCR ，butalsoexaminedbydoubleimmunolabeling，witllanti-CDub／cantibodystainingfollowedby stainingforot7-nAChRR ．Results 450bpbandcorrespondingtod，-nAChRR wasspecificallyamplified．Thecolocaliza— tionofOf．7-nAChRR nadCDIlb／cintheculturedlaippocampalmcrioglialswasvisualizde withhtefluorescentprobes．Con- clusion RatmicroglialceilsCna expressSt-7一nAChRR invitro，whichmaybethemolceularfoundationofitsfunction． Keywords：microglial；，一nAChRR；RT—PCR；doubleimmunolabeling 研究表明，阿尔茨海默病 (AD)与 B一淀粉样蛋 司)，PCR试剂 (TAKALA公司)，PCR引物由上海基 白(AB蛋白)沉积所致的慢性炎症有关。外周迷走 康公司合成，RNA提取试剂Trizol(Invitrogin公司)。 神经释放的递质可激活巨噬细胞烟碱型乙酰胆碱受 1．2 方法 体(，一nAChRR)，减少炎性介质分泌，从而抑制外 1．2．1 小胶质细胞中 ，一nAChRR基因表达检测 周炎性反应 ¨’2J。中枢神经系统中的小胶质细胞与 采用反转录一多聚酶链式(RT．PCR)方法。Trizol体 外周 巨噬细胞具有相似性，其是否亦有 ，一nAChRR 系提取总 RNA(总 RNA经紫外分光光度仪测定 表达 目前鲜见报道。2007年 10月 ～2008年5月， A260和A280，比值 1．8)。以提取的mRNA为模 我们观察了仪，一nAChRR在体外培养小胶质细胞中 板按照反转录试剂盒说明书合成c