体外非接触性共培养对MSC向软骨细胞诱导分化的实验观察.pdfVIP

维普资讯 · 论著 · 2008年7月第5卷第19期 体外非接触性共培养对 MSC向软骨细胞 诱导分化的实验观察 田 力，梁晓鹏，汪 卓，李 娜 ，田晓晔，范妮娜 (沈阳医学院临床实验中心 ，辽宁沈阳 110034) 摘【要】目的：探讨骨髓基质干细胞(MSCs)与软骨细胞体外非接触性共培养成软骨的可行性。方法：分离、培养 、扩传 兔 MSCs及软骨细胞 ，MSCs以 1×l05个 ／ml接种于共培养板 内孔 ，第 1代软骨细胞 以 lxl04个 ／ml接种于共培养板 外空板 。48h后将 内孔插如外孔中，补充全培养基覆盖于 MSC细胞层上。以相同密度 MSC单独培养为空白对照， 观察共培养 7d和 14d流式细胞仪观察 MSC的 Ⅱ型胶原蛋 白变化情况 。结果 ：实验空 白组在 7d和 14d，11型胶 原蛋白均阴性表达 ，符合 MSC特性。非接触共培养 1周后 ，Ⅱ型胶原蛋 白阳性表达 ，与空 白对照 比较 ，PO．01，具有 统计学意义；非接触共培养 2周后 ，Ⅱ型胶原蛋 白也阳性表达 ，与空白对照 比较 ，PO．O1，同样具有统计学意义 ；实 验 14d组与实验 7d组比较 ，PO．O1，具有非常显著性差异 。结论 ：软骨微环境在 MSCs成软骨分化及体 内软骨形 成中具有重要作用 。软骨细胞能有效地诱导 MSCs向软骨细胞分化并促进 MSCs体内软骨形成。 关『键词】骨髓基质干细胞 ；软骨细胞 ；非接触共 同培养 ；11型胶原蛋 白 【中图分类号】R336 文【献标识码】A f文章编号】1673—7210(2008)07(a)一016—03 Experimentalobservation ofnon-contactinvitroco-cultureofthediffer- entiationM SC towardchondrocytes TIAN Li，LIANGXiao-peng，WANG Zhuo，LINa，TIAN Xiao-ye， Ⅳ Ni一， (ShenyangMedicalCollege，Shenyang 110034，Chin~ [Abstract]Objective：Toinvestigatethefeasibilityofthebonemarrowstromalstemcells (MSCs)andcartilagecellsin vitroco-cultureofnon-contactdifferentiatecartilage．M ethods：Isolation，culture，theproliferationofrabbit—MSCsand cartilagecells．MSCsof1xl05cells／mlwereinoculatedcultureplate．thefirstpassagecartilageof1xl04cells／mlwere inoculatedcultureplateouterspaceplate．After48hours，theinterholewereinsertedintheouterholesandthen added mediatocoverageintheMSCcelllayer．MSCwiththesamedensityas blankcontrolcultured．Co—culturedfor7days and 14days，thechangesofMSCtype 11 collagenproteinwereobservedbyflow c 0metry．Results：TheExperimental blankgroup in7and 14days，type 11collagenproteinwerenegati