葡萄球菌血浆凝酶试验方法学探讨.pdfVIP

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法血浆凝固酶试验最佳稀释度,解决玻片法假阳性问题。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1 菌株来源85株葡萄球菌从本院临床病人的血、前列腺、脑脊液、尿、脓及咽试子分离所 得。 1.1.2参考菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923,表皮葡萄球菌ATCC26069。 1.1.3血浆10%草酸钠抗凝人血浆,用0.9%氯化钠溶液作梯度稀释 1_2方法 1.2.1常规菌株鉴定革兰氏染色镜检、触酶试验、葡萄糖O-F试验、菌落形态、溶血状态及生 化反应。 清洁玻片上,各挑取1个葡萄球菌落与上述血浆研磨混合,然后摇匀,观察30s,出现肉眼可见的 粗大颗粒或小凝块为阳性,否则为阴性。以标准菌株金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌作阳性与阴性 对照,并以同样的方法用生理盐水作空白对照。 血浆各0.5ml,然后各管加待检的生理盐水菌悬液0.5ml(菌液的浓度为一个麦氏单位)。实际的稀 一次结果。阳性者多数在30min到2h出现凝固。阴性者均在24h内仍不出现凝固。同样以标准菌 株金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌作阳性与阴性对照,并以同样的方法用生理盐水作空白对照。 2结果 2.1 85株葡萄球菌中有金黄色葡萄球菌19株,溶血性葡萄球菌40株,表皮葡萄球菌14株,其 它葡萄球菌12株,菌株的鉴定结果见表1。 表1 85株葡萄球菌菌种鉴定 耐热核 新生霉未 精氨酸 硝酸盐 麦芽糖 甘露 菌名 n 磷酸酶 酸液 耐药 水解 还原 还原 醇 金黄色葡萄球菌 19 + + + + + + 溶血性葡萄球菌 40 (一) + + + 表皮葡萄球菌 14 (+) + (+) + 华纳氏葡萄球菌 5 (一) (一) + √ 玉米粥葡萄球菌 3 ‘ 腐生葡萄球菌 2 + + + 头状葡萄球菌 1 + 模仿葡萄球菌 1 + + 注:(一)表示绝大多数为阴性;(+)表示绝大多数为阳性:(√)表示不定 2.2将85株葡萄球菌进行玻片法和试管法血浆不同稀释度凝固酶试验,血浆不同稀释度其敏感性 和特异性各有差异。结果见表2。 表2 85例葡萄球菌玻片法血浆梯度稀释结果 试管法 玻片法 (1:4) 原位血浆 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 + 一 + 一 +一 + 一 + 一 + 一 + 19 O 19 0 19O 19 0 19 O 18 1 172 4422 4422 33 33 19 47 3 63 0 66 O 66 敏感性(%) 100 100 100 100 100 94.7 89.4 特异性(%) 33.3 33.3 50.O 71.2 95.5 lOO lOO 注:。+”表示阳性 “一”表示阴性 3讨论 随着葡

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