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法血浆凝固酶试验最佳稀释度,解决玻片法假阳性问题。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1 菌株来源85株葡萄球菌从本院临床病人的血、前列腺、脑脊液、尿、脓及咽试子分离所
得。
1.1.2参考菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923,表皮葡萄球菌ATCC26069。
1.1.3血浆10%草酸钠抗凝人血浆,用0.9%氯化钠溶液作梯度稀释
1_2方法
1.2.1常规菌株鉴定革兰氏染色镜检、触酶试验、葡萄糖O-F试验、菌落形态、溶血状态及生
化反应。
清洁玻片上,各挑取1个葡萄球菌落与上述血浆研磨混合,然后摇匀,观察30s,出现肉眼可见的
粗大颗粒或小凝块为阳性,否则为阴性。以标准菌株金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌作阳性与阴性
对照,并以同样的方法用生理盐水作空白对照。
血浆各0.5ml,然后各管加待检的生理盐水菌悬液0.5ml(菌液的浓度为一个麦氏单位)。实际的稀
一次结果。阳性者多数在30min到2h出现凝固。阴性者均在24h内仍不出现凝固。同样以标准菌
株金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌作阳性与阴性对照,并以同样的方法用生理盐水作空白对照。
2结果
2.1 85株葡萄球菌中有金黄色葡萄球菌19株,溶血性葡萄球菌40株,表皮葡萄球菌14株,其
它葡萄球菌12株,菌株的鉴定结果见表1。
表1 85株葡萄球菌菌种鉴定
耐热核 新生霉未 精氨酸 硝酸盐 麦芽糖 甘露
菌名 n 磷酸酶
酸液 耐药 水解 还原 还原 醇
金黄色葡萄球菌 19 + + + + + +
溶血性葡萄球菌 40 (一) + + +
表皮葡萄球菌 14 (+) + (+) +
华纳氏葡萄球菌 5 (一) (一) + √
玉米粥葡萄球菌 3
‘
腐生葡萄球菌 2 + +
+
头状葡萄球菌 1 +
模仿葡萄球菌 1 + +
注:(一)表示绝大多数为阴性;(+)表示绝大多数为阳性:(√)表示不定
2.2将85株葡萄球菌进行玻片法和试管法血浆不同稀释度凝固酶试验,血浆不同稀释度其敏感性
和特异性各有差异。结果见表2。
表2 85例葡萄球菌玻片法血浆梯度稀释结果
试管法 玻片法
(1:4) 原位血浆 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64
+ 一 + 一 +一 + 一 + 一 + 一
+ 19 O 19 0 19O 19 0 19 O 18 1 172
4422 4422 33 33 19 47 3 63 0 66 O 66
敏感性(%) 100 100 100 100 100 94.7 89.4
特异性(%) 33.3 33.3 50.O 71.2 95.5 lOO lOO
注:。+”表示阳性 “一”表示阴性
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