稳消方对兔实验性颈动脉粥样硬化ICAM-1及VCAM-1表达影响.pdfVIP

第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 稳消方对兔实验性颈动脉粥样硬化lCAM-1及VCAM-1表达的影响 霍清萍刘舍嫣 梁芳 王宇新 彭文波 上海交通大学附属第六人民医院(上海，200233) 摘要 目的：观察稳消方不同剂量对兔实验性颈动脉粥样硬化细胞间黏附分子-1(Intercellular adhesion celladhesion molecule．1，VCAM—1)表达的影响，探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法：将60只健康 新西兰大白兔随机分为空白组、干预组(稳消方高、中、低剂量组)、辛伐他汀组、模型组。 除空白组外，其余各组均给予高脂饮食饲养及颈动脉内膜球囊损伤法建立兔颈动脉粥样硬化 模型。干预8周后，检测ICAM．1含量，免疫组化法观察VCAM．1表达。结果：与空白组 比较，各组ICAM．1、VCAM一1均显著上调(均P0．05)；与模型组比较，各组指标均显著 无显著差异(均P0．05)；干预组组间比较，高剂量组ICAM．1下调明显大于低剂量组 VCAM．1的表达，益于动脉粥样硬化斑块的防治与稳定，且与药物剂量之间存在一定的依赖 关系。 动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是心脑血管病共同的病理基础，严重威胁人类健康。 循环白细胞的聚集、黏附及跨越血管内皮细胞转移在AS的发生、发展中具有重要作用【11， 这些过程主要由一系列黏附因子介导和调控。黏附因子是参与细胞间、细胞与细胞外基质问 黏附的一系列大分子，其中ICVM．1和VCAM．1在AS的形成过程中具有重要的作用。稳消 方是导师多年临床应用的经验方。本实验通过高脂饮食及颈动脉内膜球囊损伤法建立兔颈动 脉粥样硬化模型，观察稳消方不同剂量对ICVM。l、VCAM．1表达的影响，探讨其抗动脉粥 样硬化斑块的相关机制。现报道如下： 1材料与方法 1．1实验动物 102 第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 60只体重2．2～2．5kg健康新西兰大白兔，月龄34个月，雌雄不限，购自上海市中 国科学院实验动物中心。 1．2药物 稳消方(免煎)，由水蛭、地龙、丹参、丹皮、郁金、半夏各药按3：3：3：3：3：2比例混 合组成，江阴天江药业有限公司代为生产，批辛伐他汀(商品名舒降之)，默 沙东公司出品，批号2009014。用药剂量，按人与动物体重比例折掣21，折合实验兔用量(中 剂量组)：水蛭、地龙、丹参、丹皮、郁金各575 mg／kg／d，半夏383．33mg／kg／d，高、中、 低剂量组按4：2：1比例给药。辛伐他汀O．77mg／kg／d。以上药物用蒸馏水溶解，混匀后灌胃。 高脂饲料(胆固醇1％，蛋黄粉5％，猪油3％，普通食料91％)由上海市第六人民医院动物实验 中心加工而成。 1．3试剂与仪器 BX51；医学分析软件、IMS细 体：博士德生物工程有限公司；光学显微镜，日本Olympus 胞图象分析系统：上海申腾信息技术有限公司。 1．4造模 实验动物饲养在上海交通大学附属第六人民医院实验动物中心，饲养条件2级，室温保 观察7d无异常后，随机分为空白组(10只)、造模组(50只)。空白组继续标准饲料喂养，造 模组给予高脂饲料1009／d，余由标准饲料补足，均自由饮水，并采用高脂饮食及动脉内膜球 囊导管损伤法‘3-6]建立兔颈动脉粥样硬化模型。在喂饲8周高脂饮食后继续喂饲普通饲料前， 随机处死实验兔2只，于颈内、颈外动脉分叉处起向下(近心端方向)延至卜2cm拟取标本，实 验兔颈动脉内膜可见乳白色或淡黄色、大小不等的弥漫性隆起脂纹、斑块，HE染色，光镜 下可见广泛的泡沫细胞，中膜平滑肌以及弹性纤维断裂，证实造模成功。 1．5分组、给药及取材 造模成功后，将造模组随机分为稳消方高、中、低剂量组、辛伐他汀对照组组、模型对 照组。各组给予相应药物灌胃，标准饲料饲养，饲养条件同前。 8周后，禁食禁水12h，戊巴比妥钠(1．3ml／kg)麻醉实验兔，取血，离心分离血清；同 第九次全国中西医结合血瘀证及活血化瘀研究学术大会 时处死全部实验兔，无菌条件