酶菌联合降解羽毛de研究.pdfVIP

中国饲料 2015年第 3期 DOI：10．15906／j．cnki．cnl1—2975／s 酶菌联合降解羽毛的研究 杨 婷 ，廖美德 ，刘偬嘉 ，贺玉广 ，林志峰 (华南农业大学天然农药与化学生物学教育部重点实验室 ，广东广州 510642) [摘要】本试验对淡紫拟青霉和米曲酶降解羽毛能力进行 比较 ，结果发现淡紫拟青霉对羽毛有更强的降解作用。 在淡紫拟青霉降解羽毛过程 中加入枯草芽孢杆菌蛋白酶液 ，淡紫拟青霉解除胨状的时间较平时缩短 了6d左右 ，而 且在相 同生长时间条件下，加酶液后测得 的氨基酸含量要更多。由此可见，枯草芽孢杆菌蛋白酶液对淡紫拟青霉培 养液解除胨状有促进效果，酶菌联合降解羽毛效果更好 。 关【键词】枯草芽孢杆菌；蛋 白酶 ；淡紫拟青霉 ；羽毛 【中图分类号】$816．3 文【献标识码]A [文章编号】1004—3314(2015)03—0014—03 [Abstract】TheexperimentofundthatPaecilomyceslilacinushadabetterabilityofdegradationthanAspe llus0一 ryzae．Duringdowngradefeathers，mixedPaecilomyceslilacinuswiththeenzymewhichcomefrom Bacillussubtilisliftthe jellysolution6daysearlier，andthecontentofaminoacidwasmuchmorethanbefore．111isshowsthattheenzymesolution isbetterforPaccilomyceslilacinustoliftthejellyaswellastodowngradefeathers． [KeyWOrds】Bacillussubtilis；protease；Paecilomyceslilacinus；feathers 羽毛角蛋 白粗蛋 白质含量约在 80％以上 ，氨 1-3 孢子悬液的制备 将米 曲霉 (或淡紫拟青 基酸含量在 70％以上 (傅红梅 ，1997)，并且含有 霉)接种到固体 PDA中，置于 28℃恒温培养箱 中 矿物质元素、维生素以及一些未知的生长因子，是 保温培养 ，待培养基表面大量形成孢子时，向培养 良好的饲料用蛋 白资源 (张启等，2007)。但由于其 皿中加入无菌水 ，洗涤米曲霉孢子．合并洗涤孢子 结构中含有大量二硫键 ．一般方法很难将其降解 ， 悬液后备用。 因此利用率较低。本实验室初步筛选得到两株可 1．4 羽毛 降解试验 在制备好 的羽毛培养基 降解羽毛的真菌 ，分别为米 曲霉和淡紫拟青霉 。本 中，分别按 2％的接种量接种米 曲霉或淡紫拟青 试验对两种菌种降解羽毛能力进行初步对 比，筛 霉的孢子悬液 ．置于 3O℃、180r／min的恒温摇 选 出较适合生产需要 的菌种 ，并添加枯草芽孢杆 床 中培养 ，每 24h取样 ，抽滤 ，测定滤液 中氨基 菌酶液 ，对酶菌联合降解羽毛的能力进行研究，为 酸的含量 。 工业化生产提供理论参考。 1．5 氨基酸含量测定 甲醛滴定法 ：将滤液置于 1 材料与方法 适当大小 的烧杯 中，加入 20mL蒸馏水混匀。开 1．1 试验材料 米 曲霉菌 (Aspergillusoryzae)、 动磁力搅拌器 ，用 0．01mol／LNaOH标准溶液滴 淡紫拟青霉 (Paecilomyceslilacinus)和枯草芽孢杆 定至 pH为 8．20．然后快速加入 5．0mL的甲醛溶 菌 (Bacillussubtilis)由华南农业大学实验室保存 ； 液 (38％)混匀 ，接着加入 NaOH