鲤鱼赤小豆汤对阿霉素肾病大鼠尿蛋白排泄量的影响.pdfVIP

1 实验资料 1.1 动物 成年健康 Wistar 大鼠 50 只，体质量（180±20g），SPF 级，雌雄各半。由山东鲁抗医药有 限公司提供（许可证号：SLXK 鲁）。 1.2 药物及试剂 鲤鱼赤小豆汤：鲤鱼采用自河南省水产研究院黄河鲤良种场的雄性黄河鲤，赤小豆 选用内蒙古产身干，颗粒饱满，紧小而赤黯色者。按照 《本草纲目》原方记载量鲤鱼 250g ，赤小豆 100g， 按比例同煎 6h，滤出鱼汤，浓缩至 350%浓度（即 1mL 含鲤鱼赤小豆 3.5g ），置-20℃冰箱中冷藏备用， 使用前 1h 置恒温水浴锅 36℃加热。福辛普利钠片（蒙诺）购自中美上海施贵宝制药有限公司产品（批 号 0905093 ）。阿霉素（注射用盐酸多柔比星，ADR ）购自浙江海正药业股份有限公司产品（批号 090301B ）。尿蛋白试剂购自北京利德曼生化技术有限公司产品。总蛋白、白蛋白试剂购自宁波瑞源生 物科技有限公司产品。 [2] 1.3 模型建立 参照 Bertani 等 的方法，大鼠适应性喂养一周，测尿蛋白阴性后，随机分为造模组（40 只）：尾静脉注射阿霉素 4mg/kg ，阿霉素浓度 2mg/ml ，如尾部无迂曲、肿胀表示注射成功，常规喂养 7 天后再次尾静脉注射阿霉素 3.5mg/kg 。空白对照组（N 组，10 只）：尾静脉同步注射等量生理盐水。 1.4 动物分组及干预 造模组按照随机区组原则分为 4 组（每组 10 只）：模型对照组（M 组），9ml/kg 自来水灌胃；福辛普利对照组（F 组），0.1mg/ml 福辛普利 9ml/kg 灌胃；鲤鱼赤小豆汤高、低剂量干预 组（G 组、D 组），350% 、175% 鲤鱼赤小豆汤 9ml/kg 灌胃（鲤鱼赤小豆汤高、低剂量组剂量分别相 当于 70kg 正常成人剂量的 2 倍、0.5 倍，按照大鼠与人体表面积的折算系数 0.018 计算）。正常对照组： 9ml/kg 自来水灌胃；每日1 次，共灌胃干预 3W 。 1.5 观察指标 1.5.1 一般状况 大鼠饮食及饮水量，精神状态，活动量，二便，体重等。 1.5.2 12h 尿蛋白排泄量 实验大鼠 ADR 注射前和 ADR 注射后每 6d，共 3 W，将大鼠置于代谢笼中， 自由饮水，断食，记录尿量，留取 12h 尿标本，留取时间为 8 AM 至 8 PM 。半自动生化分析仪 （TRACE-CB171 ，上海合意实业有限公司）终点法测定 12h 尿蛋白排泄量（mg ）。 1.5.3 血清总蛋白、白蛋白 干预 3 W 后处死大鼠，摘眼球取血，全自动生化分析仪（奥林帕斯AU640 ， 日本OLYMPUS 光学株式会社）终点法检测白蛋白（ALB ）、总蛋白（TP ）水平（g/L ）。 1.5.4 组织病理学 处死大鼠，取出肾脏， 4% 多聚甲醛固定，4 ℃保存。光镜下观察肾脏组织中肾小 球毛细血管内皮细胞、基底膜、系膜基质、系膜细胞、肾小管、肾间质等变化情况。 1.6 统计分析 计量资料以（X 士 S ）表示，结果用 SPSS 16.0 统计软件处理。不同分组不同时间 12h 尿蛋白排泄量比较采用重复测量资料的方差分析及 LSD 组间比较；血清蛋白数据采用单因素方差分析 及 LSD 组间比较，以 P ＜0.05 为有显著性差异。 2 结 果 2.1 一般状况 正常对照组大鼠精神佳，动作灵敏，无水肿等病理表现，体重增长稳定。所有造模组大 鼠第二次注射ADR 2~3 d 后，均不同程度表现出精神萎靡，倦怠少动，饮食、摄水减少，大便呈稀糊 状，体重增长较正常组慢；1 W 左右出现不同程度阴囊水肿，3 W 后，各组大鼠状况均不同程度改善， 以模型组恢复最慢。 2.2 大鼠 12h 尿蛋白排泄量 重复测量的方差分析结果提示重复效应的差别具有显著性意义 （F=47.213 ，P ＜0.01 ）。组间效应的差别具有显著性意义（F=12.734 ，P ＜0.01 ）。时间因素与处理因素 之间具有交互作用（F=6.068 ，P ＜0.01 ）。 各时间点比较结果提示造模前各组 12h 尿蛋白排泄量间差异无显著性意义（F=0.073 ，P=0.788 ）。 造模后各造模组 12h 尿蛋白排泄量间无显著性意义（F=0.387 ，P=0.764 ），与N 组比较均有显著性意义 （P0.01 ），表明造模成功。鲤鱼赤小豆汤和福辛普利均有降低尿蛋白的作用，鲤鱼