断体地龙提取液对小鼠创伤愈合作用的实验研究.pdfVIP

time (reduced by an average of 3.66 days), and improve wound healing rate. The difference was statistically significant ( P 0.05 ). HE staining of the wound tissue showed that the 3rd day earthworm extract after broken was able to accelerate the reduction of the number of inflammatory cells in the early period of wound healing (3 days or so), and could produce large amounts of collagen fibers to promote the regeneration of skin tissue in the later period of wound healing (10 days or so) with contrast of the complete earthworm extract. Conclusion: The 3rd day earthworm extract after broken has a significant effect on promoting wound healing, which is different from the complete earthworm extract. This study lays the foundation for the further study of the promoting wound healing components of the earthworm. 【Key Words 】Broken earthworm; Wound healing; Histological examination 地龙作为传统中药，在我国应用历史久远。由于其具有很强的自身修复和再 生能力，在民间及许多地区作为传统验方治疗各种皮肤创伤。国内外对于断体诱 导地龙生成促进创伤愈合物质作用的研究尚属空白。本实在前期研究的基础之 上，通过建立小鼠创伤模型，选取地龙断体后第3天的提取液与未断体地龙的提 取液分别作用于伤口，观察伤口愈合情况，通过计算创面愈合时间、创面愈合率 和进行创面组织学检查，评价断体地龙与未断体地龙提取液的作用的差异，并为 进一步分离研究断体地龙中促进创伤愈合的活性物质，阐明地龙促进创伤愈合的 机制奠定基础。 1 材料与仪器 1.1 材料 地龙断体后第 3 天提取液、未断体地龙提取液（前期实验制备）；健康清洁 级ICR小鼠，规格24-30g，雄性（购自北京维通利华实验动物技术有限公司）； 手术剪刀，无菌纱布等。 1.2 主要仪器和试剂 光学显微镜：奥林帕斯CX31-32L02；酸度计：上海伟业仪器厂pHS-3C；-80 度冷冻冰箱：中科美菱DW-HW138。 水合氯醛（分析纯，天津市光复精细化工研究所），乙醇、甲醛等试剂（分 析纯，北京化工厂）；Tris试剂（北京拜尔迪生物科技有限公司），生理盐水（北 京同仁堂药店）； [1~2] 2 方法 2.1 创伤模型制备 ICR 小鼠用 10％的水合氯醛按 0.003mL/g 剂量麻醉后，用 8%的硫化钠脱去 背部 2cm×4cm 的体毛，生理盐水清洗干净，再用 75%酒精（碘伏）消毒，然后 在小鼠背部脊柱两侧旁开2 cm处,用打孔器切除直径为1cm的圆形全层皮肤，深 度至皮下（皮肤到肌层），但不要伤及脊柱旁或腹部肌肉上的脂肪和筋膜，小鼠 脊柱左右两侧各一个伤口。术后伤口用 75%酒精消毒,无菌纱布覆盖。造创后， 无菌纱布覆盖背部，放入清洁笼内饲养，自由饮水取食。 2.2 分组与给药 小鼠造模后随机分为3组，第一组：未断体地龙提取液组，第二组：断体后 第3天提取液组，每组6只，用于观察愈合时间和创面愈合率；第三组：24只， 随机分为两小组，每组 12 只，分别给予未断体地龙提取液、地龙断体后第 3 天 的提取液，为用于创面组织学检查。每组小鼠左侧伤口均滴入 0.2ml 的溶媒 (0.01M PH7.2Tris-HCl 缓冲液，前期实验结果表明地龙提取物的溶媒与空白组 比较对创伤愈合的影响无显著性差异)作为自身对照，右侧伤口按照分组给予未