乙型肝炎病毒e抗原相互作用蛋白基因克隆化及功能初步与研究.pdfVIP

第五届华北地区三省两市检验医学学术会议论文汇编 IL·12release mmIL·18asall indicatoroflehtia early duimgpostopear-tireespsis：highsepredictive outcome[J]．Shcok，2002，18(4)：301-305． 6．SablotzldA，Friderich J，eta1．The I，Muhling systemicifnlammatoyrresponse cardiac of in with and and surgeyr：diferentexpressionproiflnammatoyrcytokinse prcoalcitoninpatienst without multiogmadysfunctions[J]．Perfusion，2002，17(2)：103．109． 7．翁海滨，李森，张广谦，等．胸腹部创伤病人外周血中IL．12的水平及临床意义．临床急诊杂 志，2008，9(2)：109～111． DOT--1904． 9．周满红，裴天容，黄莉，等．多发性创伤后血清IL．1、IL．8、IL．10及n旺．Q观察．贵州医药， 2006，30(10)：933～935． 10．郎中兵，文亮，楚军．严重创伤后并发ARDS患者血清TNF．和IL．8的动态变化及意义．中 国危重病急救医学，2004，16(7)：432～433． S．KernerT，Ahlers detectionofincreased turnoutnecrosis 11．Spielmann O，etal．Early factoralpha (TNF-a)andsolubteTNF levelsaftertraum receptorproteinplaslxla arevealsassociationswiththe clinical Scandinavica，2001，45：364-370． course[J]．ActaAnaesthesiol 乙型肝炎病毒e抗原相互作用蛋白基因的克隆化 及功能的初步研究 李伯安侯俊李永利徐军 史佳彬毛远丽 解放军第三。二医院临检中心(100039) 摘要乙型肝炎病毒(HBV)感染致肝细胞损伤的机制，与病毒蛋白和肝细胞蛋白间的相互作 DNA前．C基因区编码的一种非颗粒性的分 用密切相关。而乙型肝炎e抗原(HBeAg)是由HBV 泌蛋白，随HBV复制而增加，临床上将其作为判断HBV活动性复制的指标之一。因此研究HBeAg 与肝细胞内蛋白的相互作用及其机理，能在一定程度上对HBV的致病机制做出解释，并为寻找有 效防治方法提供新线索。 酵母双杂交技术是一种研究蛋白．蛋白间相互作用的比较快速、可靠并可大规模筛选的方法。 本实验所采用酵母双杂交系统．3，基于两种单倍体酵母a和ct型可以配合形成二倍体，而其中表达 的外源蛋白仍能相互作用的机理，免去了低效率文库质粒与诱饵质粒共转染的问题，大大提高了杂 交效率；在原技术基础上增加了3个报告基因，降低了假阳性率。我们利用该技术，根据中国HBV 流行株序列设计引物，应用多聚酶链反应(PCR)技术，由乙型肝炎患者血清中分离出HBeAg编 码基因序列。经测序鉴定正确后，克隆入酵母表达载体pGBKT7中构建“诱饵”质粒，转化酵母