苯酚降解菌JS-1的筛选及降解特性的初步研究.pdfVIP

第40卷第 1期 上海师范大学学报(自然科学版) Vo1．40．No．1 2011年 2月 JournalofShanghaiNormalUniversity(NaturalSciences) Feb ．，2011 苯酚降解茵 JS-1的筛选及降解特性的初步研究 高雁辉，黄晶心，张 辉，李 琳，肖 明 (上海师范大学 生命与环境科学学院，上海 200234) 摘 要：从上海金山区第二工业园区的污水池淤泥中分离出一株能够降解苯酚的菌株 JS．1， 该菌株能够在以苯酚为唯一碳源和能源的无机盐培养基上生长，经 16SrDNA分子比对及其 形态、生理生化分析，初步鉴定该菌为粪产碱菌(Alcaligenesfaecalis)．该菌在30cC时的降解率 最高，达93％，在25～35℃范围内的降解率均达70％以上，在苯酚浓度低于500mg／L时，降解 率达75％以上，接种量在0．5～1．5mL时苯酚的降解率最为明显，达93％以上，在有外加碳源 葡萄糖加入时可以相对提高菌株的降解效率，从而缩短降解周期．为污染土壤的微生物修复提 供理论指导． 关键词：金山工业园区；苯酚降解；粪产碱菌；分子鉴定；降解特性 中图分类号：X172 文献标识码：A 文章编号：1000—5137(2011)01-0074-06 随着化工、石油、农药等现代工业 的发展，开发出了一大批有机高分子化合物，其中绝大多数是人工 合成且是危及人类健康的有害物质，苯酚是最常见的一种水溶性有机污染物llJ，含酚废水的大量排放， 污染水源，毒死鱼虾，对人类生存的环境造成了极大的危害．美国环境保护署和我国相继把苯酚列入环 境首要污染物的 “黑名单” ． 对含酚废水的处理方法有很多，其中尤以生物降解法最经济，且无二次污染，众多国内外学者在这 方面作了大量的研究，分离出了大量能高效降解酚类物质的微生物，已报道的可以降解苯酚的微生物有 芽孢杆菌 j、假单胞菌 J、节杆菌 j、克雷伯氏菌 J、醋杆菌 等．本实验室从黄河三角洲胜利油 田分离 的P2菌株具有高效的降酚能力，经初步鉴定为类产碱假单胞菌 ，这与黄河三角洲地区石油污染和土 壤盐渍化程度密切相关 J，以及在上海苏州河 中游分离的SZH3菌株，降酚能力与P2菌株相 比更为明 显，经初步鉴定为泛菌属 ¨．某些菌株除了能降解苯酚外，还具有诱导 甲苯降解和促进植物生长的作 用，而且不同降酚菌之问又存在着与 甲苯降解相关的基因水平转移 ． 结合上海工业化工区分布的布局特征，选择采样地为污染比较严重的上海金山工业园区，从中筛选 出一株能够高效降解苯酚的菌株，通过 16SrDNA分子鉴定以及在不同环境因素下菌株降解苯酚能力 的研究，以期为污染土壤的微生物修复提供理论基础和数据支持． 1 材料与方法 1．1 样品来源 样品采集 自上海市金山区第二工业园区污水池淤泥 收稿 日期 ：2010-09-26 基金项 目：上海市科学技术委员会重大项 目(07DZ12038和04DZ19304)；上海师范大学重点学科(DZLT09) 作者简介：高雁辉(1982一)，男，上海师范大学生命与环境科学学院硕士研究生；肖 明(1961一)，男，上海师范大 学生命与环境科学学院教授． 通信作者 第 1期 高雁辉，黄晶心，张 辉，等：苯酚降解菌Js一1的筛选及降解特性的初步研究 75 1．2 培养基 1．2．1 富集培养基 牛肉膏5g，蛋 白胨 10g，氯化钠 5g，苯酚 300mg，蒸馏水定容至 1000mL，pH值 7．0～7．2，培养基 中加入的苯酚均在灭菌后加入． 1．2．2 无机盐筛选培养 KH2PO40．5g，K2HPO40．5g，MgSO4·7H2O0．2g，CaC120．1g，NaC10．2g，NH4NO31g，微量元素 1mL，苯酚需要量按实验所需确定，固体培养基加入2％的琼脂，用蒸馏水定容至 1000mL，pH值7．0～ 7．2，微量元素为七水合硫酸亚铁 (FeSO ·7H0)0．25g，硫酸锰 (MnSO)0．065g，七水合硫酸锌 (ZnSO ·7H0)0．04g，氯化钴 (CoCI：)0．1g，蒸馏水