IGFBP7对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响及其机制.pdfVIP

ChineseJoumalofPathophysiology 2012，28(10)：1835—1840 · 1835 · [文章编号] 1000-4718(2012)10—1835一o6 IGFBP7对人乳腺癌 MCF一7细胞增殖的 影响及其机制 袁 磊， 左曙光， 范文娟， 宋国华 (漯河医学高等专科学校，河南 漯河462002) [摘 要] 目的：探究胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)对人乳腺癌MCF一7细胞增殖的影响及其分 子生物学机制。方法：将质粒pCMV6一IGFBP7转染 MCF一7细胞，构建稳定表达IGFBP7的MCF一7细胞系；采用 Westernblotting检测 IGFBP7在 MCF一7细胞稳定转染子的表达 ；采用软琼脂培养克隆形成实验检测 IGFBP7对 MCF一7细胞克隆形成能力的影响；采用流式细胞术检测 IGFBP7对MCF一7细胞周期的影响；采用Westernblotting 检测IGFBP7对MCF一7细胞细胞外信号调节激酶 1／2(ERK1／2)、P—ERK1／2、细胞周期素 Dl(cyclinD1)、细胞周 期素依赖性激酶4(CDK4)、cyclinE、CDK2、p21aH 盯、p27 、p53、视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)和P—Rb蛋白含量 的影响。结果：(1)只有稳定转染质粒pCMV6一IGFBP7的MCF一7细胞表达IGFBP7。(2)IGFBP7能够显著降低 MCF一7细胞的克隆形成率(尸0．01)，阻止细胞从G。期进入S期，使其停滞于G 期 (P0．01)。(3)IGFBP7能 够显著抑制ERK1／2的磷酸化(P0．01)。(4)IGFBP7能够下调 cyclinD1和cyclinE蛋白表达 (P0．01)，上调 027㈣ 、p21。，W 和053蛋白表达 (P0．01)，抑制 Rb的磷酸化 (P0．01)。(5)MEK1／2阻断剂PD98059可部 分模拟 IGFBP7的肿瘤抑制效应。结论：(1)IGFBP7可通过下调 cyclinD1和 cyclinE蛋 白表达，上调 p27 、 p21CIPI／ 和053蛋白表达，以及抑制 Rb磷酸化发挥抗肿瘤作用；(2)IGFBP7对cyclinD1和p27 的调节可能与 其抑制ERK1／2信号通路有关。 [关键词】 胰岛素样生长因子结合蛋白7；MCF一7细胞 ；ERK1／2信号通路 [中图分类号] R737．9 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．10．019 EffectofIGFBIy7onproliferationofhumanbreastcancercelllineM CF 一 7 YUANLei，ZUOShu—guang，FANWen—juan，SONGGuo—hua (LuoheMedicalCollege，Luohe462002，China．E—mail：thmgh@163．corn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatethemechanismthatinsulin—likegrowthfactorbindingprotein7(IGFBP7) inhibitsproliferationofhumanbreastcancercelllineMCF一7．METHODS：PlasmidpCMV6一IGFBP7oremptyplasmid was transfeetedintoMCF一7cells．TheexpressionofIGFBP7inMCF-7ceHsaftertransfectionwas detectedbyWestern blotting．TheeffectsofIGFBP7onthecolony—formingefficiencynadthecellcyclewere studiedbysoftagarcolonyfomr a- tionassayna dflowcytometry，respectively．Th eef