siRNA沉默fas基因减轻大鼠肝移植供肝冷保存和缺血再灌注损伤.pdfVIP

siRNA沉默fas基因减轻大鼠肝移植供肝冷保存和缺血再灌注损伤.pdf

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中国病理生理

维普资讯 生国痘理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008,24(2):315—319 · 3l5 · [文章编号] 1000—4718(2008)02—0315—05 siRNA沉默fas基 因减轻大 鼠肝移植供肝冷 保存和缺血再灌注损伤 李 玺 , 张俊峰 , 郭卫平 , 陆敏强 杨 扬 ,许 赤 , 李 华 , 汪根树 , 胡 斌 ,池信锦 , 陈规划 (中山大学附属第三医院 肝移植科 , 胃肠外科,麻醉科,广东 广州510630, 中山大学达安基因诊断中心,广东 广州 510590) 【摘 要] 目的:探讨针对 s的siRNA对大鼠原位肝移植供肝冷保存和缺血再灌注损伤的拈抗作用及机 制。方法:(1)化学合成针对大鼠. 基因的3对siRNA,转染大鼠正常肝细胞 (BRL细胞),筛选抑制效果最高的 siRNA序列。(2)对 sD大鼠用水压注射法转染丘ssiRNA,48h后取肝 ,供肝冷保存2、4、6h后行细胞凋亡指数及 丘s表达检测。(3)对照组 ssiRNA组各25对 sD雄性大鼠,供肝冷保存 3h后行原位肝移植,再灌注后 1、3、6、12 和24h每组各处死5只大鼠,查血谷丙转氨酶 (ALT);取供肝查如 mRNA表达、Fas蛋白水平和细胞凋亡计数。 结果:315位点的siRNA抑制BRL细胞. 基因效率最高。供肝冷保存实验中 √ siRNA组冷保存2、4、6h的肝脏 如 表达与细胞凋亡指数低于对照组(P0.01)。大鼠肝移植复流后, siRNA组各检测点的如 基因表达、蛋白 水平均明显低于、凋亡细胞少于、血清 ALT低于对照组。结论:针对丘s的siRNA对大鼠肝移植中的供肝冷保存和 缺血再灌注损伤有一定的拈抗作用。 [关键词] 基因,如 ;siRNA;器官保存;再灌注损伤;大鼠;肝移植 [中图分类号] R363 [文献标识码] A siRNAtargetingfasprotectsdonorliveragainstcoldpreservationandis- chemicreperfnsioninjuryinratlivertransplnaattion LIXi,ZHANGJun—feng ,GUOWei—pin ,LUMin—qiang ,YANGYang ,XUChi, LIHua,WANGGen—shu ,HUBin ,CHIXin—iin ,CHENGui—hua (。DepartmentofLiverTransplantation,DepartmentofGastrointestinalSurgery,DepartmentofAnesthesoilogy, rd fn州 Hospital,SunYat—senUniversity,Guangzhou510630,China ; DaanGene DiagnosticCenter,SunYat—senUniver— sity,Guangzhou510089,China.E—mail: @gzsums.edu.cn) [ABSTRACT] AIM:Toinvestigatethesilencingeffectoffa~siRNAtoalleviateischemic—reperfusion(I/R)in— juryinlivertransplantation.METHODS:Threepairsof21一ntsynthesized如 siRNAsweretrnasfectedintoBRLcells respectivelyforevaluationofsilenceefficacy,andthemosteffectivefassiRNAWillschoseninvivoofrexperiment.Incold

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