新生大鼠心肌成纤维细胞培养方法的比较.pdfVIP

· 380 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(2)：380-384 [文章编号] 1000—4718(2014)02—0380—05 新生大鼠心肌成纤维细胞培养方法的比较 孙 刚， 薛睿聪， 刘 晨， 董吁钢 (中山大学 附属第一医院心血管医学部，卫生部辅助循环重点实验室，广东 广州510080) [摘 要] 目的：建立并比较新生大鼠心肌成纤维细胞的培养方法。方法：分别通过胶原酶+胰酶消化法和 胰酶消化法对新生大鼠心肌组织进行消化，利用贴壁时间差分离心肌细胞和心肌成纤维细胞，然后对收集的心肌 成纤维细胞进行形态、纯度及对药物反应方面的检测。结果：在细胞形态和纯度方面，2种方法收集的心肌成纤维 细胞没有明显差异，但用胶原酶+胰酶消化法可以获得更多数量的心肌细胞 ；在药物反应方面，采用胰酶消化法获 得的心肌成纤维细胞比胶原酶+胰酶消化法具有更强的增殖能力。结论：采用胶原酶+胰酶消化法和胰酶消化 法可以获得相同形态和纯度的心肌成纤维细胞，但是采用胰酶消化法获得的心肌成纤维细胞对药物具有更强的增 殖反应能力。 [关键词] 心肌成纤维细胞；胶原酶；胰酶 [中图分类号] Q253 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2014．02．035 Comparisonoftwomethodsforculturingneonatalratcardiacfibroblasts SUN Gang，XUERui—cong，LIU Chen，DONG Yu-gang (DepartmentofCardoilogy，TheFirstAffiliatedHospital，KeyLaboratoryofAssistedCirculation，MinsitryofHealth，Sun Yat—senUniversity，Guangzhou510080，China．E—mail：dongxg@ma il．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toestablishandcomparethemethodsforculturingneonatalratcardiacfibroblastsculture． METHODS：Neonatalratheartswereisolatedbycollagenase+trypsinortrypsindigestion．Thecardiomyocytesandcardi- acfibroblastswereisolatedbydifferentattachmenttechniques．Theceltularmorphology，purityandreactionstothereagent weretested．RESULTS：Formoprholoyg andpurity，nodifferencebetweenthe2methodswasobserved，thoughmoremyo— cyteswereharvestedbythemethodofcotlagenase+trypsindigestion．Forthecellulra responsestoreagent，thecradiacfi· broblastsharvestedwithtrypsindigestionhadmorepotentproliferativeabilitythanthosewithcollagenase+trypsindiges— tion．CONCLUSION：Thereisnodifferenceofcellularmoprholoyg andpurityinthecardiacfibroblastsisolatedbycolla— genase+trypsindigestionandtrypsindigestion．butthefibroblastswithtrypsindigestionhavemorepotentproliferativeabil- iIy． [KEYWORDS] Cardiacfibroblasts；Coltagenase；Tryp