雪胆素乙诱导刀豆蛋白A刺激的小鼠淋巴细胞凋亡及其机制的研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(3)：509-513 · 509 · [文章编号] 1000—4718(2014)03—0509—05 雪胆素乙诱导刀豆蛋白A刺激的小鼠淋 巴细胞凋亡 及其机制的研究术 胡 波。， 施资坚 ， 王 遥 ， 刘坤鹏 ， 潘 浩 ， 尹 良红 (暨南大学 附属第一医院肾内科 ，生命科学技术学院免疫生物学系，广东 广州 510632) [摘 要】 目的：分析雪胆素乙(CulIb)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠淋巴细胞体外凋亡的影响，并探讨 其作用机制。方法：以AnnexinV染色结合流式细胞术分析小鼠淋巴细胞凋亡情况；利用 JC．1染色分析淋巴细胞 线粒体膜电位变化；Westernblotting检测凋亡相关蛋白变化。结果：CulIb处理后 ，早期和中期凋亡细胞比例明显 增加，淋巴细胞线粒体膜电位降低。同时，CulIb以剂量依赖方式激活 caspase．3凋亡通路并明显降低抗凋亡蛋白 survivin的表达。结论：CulIb诱导淋 巴细胞凋亡，其机制可能与其降低线粒体膜电位 、激活 caspase一3凋亡通路 有关。 [关键词] 雪胆素乙；淋巴细胞 ；刀豆蛋白A [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．03．021 Cucurbitacin IIb inducesapoptosisofconcanavalin A-activated mouse lymphocytes HUBo，SHIZi-jian，WANGYao，LIUKun—peng，PANHao，YINLiang．hong (DepartmentofNephrology，TheFirstAffiliatedHospital，DepartmentofImmunobiologyandDepartmentofCellBiology， CollegeofLifeScienceand Technology，JinanUnive~ity，Guangzhou510630，China．E—mail：yin·yun@126．tom) [ABSTRACT] AIM：Toexplorethepotentialanti—inflammatoryeffectandtheunderlyingmechanismofcucurbita- cinIIb(CuIIb)onconcanavalinA (ConA)一activatedmouselymphocytes．METHODS：Thecellapoptosiswasanalyzed byflowcytometrywithAnnexinVstaining．ThechangeofmitochondrialmembranepotentialwasdetectedbyJC·1staining． Thelevelsofcaspase·3，phosphorylatedH2AX andsurvivinweredetectedbyWesternblotting．RESULTS：Compared withConA-activatedlymphocytes，thesignificantincreasesintheproportionofthecellswithreducedmitochondrial mem— branepotentialorwithincreasedAnnexinV stainingwereobserved，reflectingincreasedapoptosisinCuIIbplusConA— treatedcells．Theincreasedlevelsofactivatedcaspase-3andphosphorylatedH2AX (amrakerofdouble-strandedDNA breaks)weremanifestedinConA—activatedcellsCO-treatedwithCuIIb．Althoughonlyaslightdifferenceofclea