野生型PTEN基因对卵巢癌细胞株的影响.pdfVIP

维普资讯 · 1516 · ChineseJournalofPathophysiology 2007，2 (墨)； 鱼二!! [文章编号] 1000—4718(2007)08—1516—04 野生型 P雅 基因对 同巢癌细胞株的影响 王 斌， 傅庆诏， 李晓翠， 孙 丽 (山东大学齐鲁医院超声室，山东 济南 250000) [摘 要] 目的：观察转入野生型P陋Ⅳ基因的卵巢癌细胞生物学行为变化，探索该基因对卵巢癌细胞周期的 影响和抑制肿瘤侵袭的机制。方法：将野生型P陋Ⅳ基因的pcDNA3．1Hygro(一)真核质粒载体转染SKOV3细胞系， 潮霉素筛选稳定表达细胞株并扩增培养；采用流式细胞术检测肿瘤细胞周期变化；用 M1Tr法检测细胞抑制率。分别 用RT—PCR检测转染前后PTENmRNA表达水平变化 ；采用重组基底膜侵袭模型，观察转染前后细胞侵袭力的变 化。结果：成功转染SKOV3并稳定表达P陋Ⅳ，转染P陋Ⅳ可以明显改变SKOV3细胞周期 ，使其阻滞于s期；明显抑 制肿瘤细胞的侵袭力。结论：提示转染外源野生型P _Ⅳ基因可使SKOV3细胞周期阻滞于 s期，并且通过抑制肿瘤 细胞侵袭与生长，而具有明显的抑癌作用。 [关键词] 卵巢肿瘤 ；基因，PTEN；转染 ；细胞周期；肿瘤侵袭 [中图分类号] R363 [文献标识码] A EffectofPTEN geneoverexpression oncellcycleand tumorinvasion in a hmu an ovariancarcinomaSKOv3cellline WANGBin，FUQing—zhao，LIXiao—cui，SUNLi (DepartmentofUltrasound，QiluHospital，ShandongUniversity，Jinan250000，China) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheroleofphosphataseandtensinhomologydeletedonchromosome(P咂Ⅳ) geneinthecellcycleandinvasionabilityofhumanovarina carcinomaSKOV3celllineinvitro．METHODS：Humna ovari- 8ncarcinomaSKOV3cellsweretrnasfectedwithaeukaryoticexpressionplasmidvectorcontainingPTEN geneinvitro．na d thenhtepositivecellcloneswereselectedna damplified．MTImehtodWas usedtoobservetheinhibitoryrate，flow cytometry Was usedtodetectthecycleoftransfectedPTEN cellsna dapoptosisleve1．W esternblottingnaalysisWas usedtodetermine PTEN geneexpression．TheinvasivenessoftransfectedcellsweremeasuredqunatitativelybyMatrigelinvasionassays(Trna- sweHchamber1．RESULTS：TheexpressionofPTENmRNAinSKOV3cellsincreasedaftertransfectionwithPTENgene． Flowcytometry showedthatthepercentageofcellsinSphaseincreased，butthatinG2／M phasedecreased．Invasivenessof SKOV3Was significnatlydecreased．CONCLUSION ：Th etrnasfectionofPTEN ge