中和剂悬液定量鉴定试验方法探讨研究.pdfVIP

注法进行培养。第1组无菌或仅有少量试验菌生长，第2组有较第1组为多，但较第3、4、5组为少， 3、4、5组有相似菌量生长，组间菌落数误差率不超过15％为合格，所用消毒液为用去离子水配制成 的0．2％的聚六亚甲基单胍盐酸盐溶液，消毒液和菌悬液作用时间为30秒。 1．2．3肉汤培养法中和剂悬液定性鉴定试验 按照《消毒技术规范》(2002)版第2．1．1．5．5条试验步骤，同样共分6组，不同之处是在培养的 时候，取l毫升液体加入到8毫升营养肉汤培养基中进行定性培养。第l、6组无菌生长，第2、3、4、 5组有茵生长为合格，所用消毒液为用去离子水配制成的O．2％的聚六亚甲基单胍盐酸盐溶液，消毒液 和菌悬液作用时间为30秒。 2结果 2．1中和反应指示鉴定试验 结果表明第1组不加中和剂PVSK时，消毒液与甲苯胺蓝不反应，溶液显示甲苯胺蓝本身的蓝色， 第2组消毒液加入PVSK后溶液立刻变为紫色，提示，消毒液已与中和剂PVSK聚合完全，甲苯胺蓝 可以灵敏的指示消毒液与中和剂的聚合完全与否。 图1甲苯胺蓝指示聚六亚甲基单胍盐与PVSK反应鉴定结果 m1聚六亚甲基单胍盐+两滴甲 第1组为：0．5ml聚六亚甲基单胍盐+两滴甲苯胺蓝；第2组为：0．5 苯胺蓝+4．5mlPVSK 2．2 TSA倾注法培养中和剂悬液定量鉴定试验 组(各试剂对照)无菌检出(表1)。所用中和剂PVSK可能不能有效中和消毒液的杀菌能力。 表1TSA倾注法培养中和剂鉴定实验结果 ．．141．． 2．3肉汤培养法中和剂悬液定性鉴定试验 3次重复试验结果表明，第1组无菌生长，提示消毒液具有杀灭或抑制细菌的作用，第2组有菌生 长，证明中和剂能有效中和消毒液的杀菌能力，受损的细菌已恢复生长，第3，4组有菌生长说明，中 和剂PVSK以及中和产物无杀灭或抑制细菌的作用。结合2．2的试验结果，可以证明，中和剂PVSK 能有效中和O．2％聚六亚甲基胍盐消毒液的杀菌作用。 表2肉汤培养法中和剂悬液定性鉴定试验 注：‘‘-_?’表示无菌生长：：‘‘+‘‘表示有菌生长。 3讨论 在研究和评价消毒液杀菌效果试验中，选择合适的中和剂尤为重要。寻找到能有效中和消毒液杀 菌能力的中和剂，才能准确的反映消毒液的杀菌能力。而在实际工作过程当中，按照《消毒技术规范》 (2002)版第2．1．1．5．5条描述的中和剂悬液定量鉴定试验操作程序进行试验，很多时候会遇到第2组 无细菌生长，到底是消毒液杀菌能力太强，在规定的作用时间内将细菌全部杀死了，导致无细菌生长， 还是所用中和剂不能有效中和消毒液的杀菌能力，导致无菌生长，亦或是在规定的作用时间内，消毒 液并没有将细菌全部杀死，剩余的受损的细菌使用TSA倾注法培养，在固体琼脂糖培养集中无法恢复 生长呢。 按照目前的中和剂鉴定方法，较难澄清这个问题。因为到底消毒液与中和剂发生了什么样的反应， 两者之间有没有发生反应，没有方法能直观的得到证明。 笔者在测定聚六亚甲基单胍盐酸盐含量的试验过程当中，建立了胶体滴定法用于其含量的测定， titration 取得了较好的结果。胶体滴定方法…(Colloidratio，又称聚电解质滴定)，是利用一些电荷密 度已知且性能比较稳定的阴阳离子聚电解质作为标准液，对被测试样进行电荷测量的一种滴定方法。其 原理是阴阳离子聚合物之间由于静电引力而吸附生成电荷配比为l：l的聚离子复合物，当用阴离子聚 电解质滴定阳离子聚合物时，随着滴定的进行，阴离子聚电解质不断地与阳离子聚合物复合，直到把指 示剂置换出来，并与指示剂复合使颜色或者荧光强度发生转折性变化，即为终点。聚六亚甲基单胍盐酸 盐是聚阳离子物质，聚乙烯基硫酸钾(PVSK)为聚阴离子物质，是目前在造纸行业使用广泛的阴离子 滴定液，甲苯胺蓝是一种盐基色素，其本身带正电荷，不会与阳离子聚电解质发生作用，所以在正电 解质溶液中呈现其自身的蓝色，当加入负电解质PVSK后，负电解质PVSK首先与溶液中的正电解质 反应，当负电解质PVSK稍微过量后立即与甲苯胺蓝结合，使甲苯胺蓝由原来的蓝色变为紫红色，从 而准确的反映出正负聚电解质间反应的终点。 ．142． 基于这一现象，如果采用PVSK为中和剂来进行聚六亚甲基单胍盐