Nrf2-ARE通路在老化和突变SOD1G93A星形胶质细胞中的改变.pdf

中文摘要 G93A Nrf2一ARE通路在老化和突变SODl 星形胶质细胞中的改变 摘 要 星形胶质细胞是中枢神经系统中的主要一种细胞。它们不仅对神经元 具有结构上的支持和营养，而且在中枢神经系统功能的完整性方面具有重 要作用。星形胶质细胞通过清除细胞外的谷氨酸和钾参与离子平衡，并且 与神经元和其它胶质细胞通过相互作用来进行着信息交流。星形胶质细胞 直接和间接参与了各种神经变性疾病损伤的病理过程。 建立纯化的星形胶质细胞是研究其生理和生化的关键。经典的方法在 纯化星形胶质细胞时消耗了大量的时间和资源，并且技术复杂，然而简单 的方法存在成纤维细胞，小胶质细胞，少突胶质细胞，内皮细胞室管膜细 胞，以及神经元的污染。为了解决这些问题，我们建立了一个酶消化为基 础的获得90％纯度的星形胶质细胞培养方法。 衰老是一个逐渐的、自然的变化过程，经历儿童期、青春期、成人 期达到成熟，以后退化，经过中年期而进入晚年。老化是随着时间，机体 细胞分裂、生长和功能丧失的过程，最后引起生命不相容性即老化过程， 最终死亡。由于中枢神经系统的高代谢，导致了它容易遭受氧化应激的损 伤。自由基随着老化不断的产生。进而，过度产生超氧和过氧化氢在金属 离子的存在下产生了大量的羟自由基。在老化过程中，星形胶质细胞的改 变下降了它们的神经元保护功能，这可能是神经元老化改变的一个原因。 氧化应激参与了老化过程并且在神经系统老化中伴有关键的作用。大量的 证据表明，星形胶质细胞在老化中的改变与氧化和抗氧化的平衡有关。并 且星形胶质细胞的激活程度与老化有关，表现为GFAP的升高。在小鼠和 大鼠的离体培养中也表现类似的结果。然而脊髓中的星形胶质细胞在老化 中的作用研究比较少见。 录增加。NQ01解毒醌及其衍生物，也可以有coenzymeQ的作用。NQ01 催化0c．tocopherolquinone生成强有力的抗氧化 中文摘要 成胆绿素、自由铁和一氧化氮。胆绿素和它代谢生成的胆红素是一种生理 的自由基清除剂，可以保护神经元抵抗氧化应激。另外，Nrf2敲除小鼠 表现了老化鼠的特征。Nrf2敲除鼠表现了氧化应激耐受力的下降，这也 and 类似于老化的大鼠。最近，Sykiotis 通路在果蝇中被氧化剂激活，诱导了抗氧化能力。Keapl是Nrf2的抑制 因子。当Keapl敲除后，果蝇的寿命延长了。这样，这个结果支持了Nrf2 通路在延长寿命中的作用。 星形胶质细胞表达突变SODlG93A选择性的造成了对运动神经元的 损伤。当运动神经元与突变SODl星形胶质细胞共培养时，44％的运动神 经元发生了死亡。突变SODlG93A星形胶质细胞分泌了一些选择性损伤 运动神经元的因子；相应的，含有突变SODlG93A的成纤维细胞、小胶 质细胞、皮层神经元和肌肉细胞与运动神经元共培养，并没有表现出显著 的神经毒性。Di Giorgio也重复出了类似的结果。当外界加入谷氨酸时， 诱导了突变SODl星形胶质细胞的变性。可见，突变SODl改变了星形胶 质细胞对运动神经元的营养和保护作用，同时也改变了星形胶质细胞自身 对外界刺激因素的抵抗能力。最近，YamanakaK等研究表明，在ALS 转基因小鼠中，选择性的使星形胶质细胞中不表达突变的SODl，显著的 延缓了小胶质细胞的激活和减慢了疾病进展。这样，含有突变基因的星形 胶质细胞是研究突变SODl毒性获得机制的一个有用模型；针对表达突变 SODl的星形胶质细胞进行干预也是治疗运动神经元变性的一条有效途 径。 神经母细胞瘤与胚胎期的运动神经元杂交，形成运动神经元样细胞系 (NSC)。NSC．34具有了运动神经元的特征：产生动作电位，表达神经丝， 合成和释放乙酰胆碱等。另外，NSC．34诱导了共培养肌肉细胞的乙酰胆 碱受体，以及在培养成熟过程中经历了微波蛋白到神经丝的转变。这样既 克服了原代运动神经元培养的费时、费力、花费高、难培养等不足，又保 留了原带运动神经元的特征。是研究肌萎缩侧索硬化的常用细胞株。 一、原代