高山红景天苷对外周性疲劳大鼠骨骼肌细胞内ATP、AMP以及Pi含量的影响.pdfVIP

江西中医药2009年 l1月第1l期总4O卷第323期 高山红景天苷对外周性疲劳大鼠骨骼肌细胞 内ATP、 AMP以及 Pi含量的影响 ★ 于洪伟 季宇彬 汲晨锋 (1．国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心 哈尔滨 150076；2．哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心 哈尔滨 150076；3．哈尔滨商业大学药物研究所 博士后科研工作站 哈尔滨 150076) 摘要：目的：测定运动大鼠体内ATP、AMP和Pi的含量变化 ，从而进一步验证红景天苷的抗疲劳作用。方法：在前期工作的基 础上采用高山红景天苷灌胃大鼠并采用高效液相法测定大鼠肌细胞 内三磷酸腺苷 (ATP)和一磷酸腺苷 (AMP)的含量，试剂 盒方法测定Pi含量变化。高效液相测定结果表明，ATP的质量浓度在0．01～0．1mg／mL范围内，AMP的质量浓度为0．02～5 mg／mL范围内，浓度与峰面积均有 良好的线性关系，其线性回归方程和相关系数分别为：Y：46555x一106．98， =0．9999；y = 20583x+1845．6，R2=0 ． 9991。结果：A1’P的含量有上升趋势。AMP含量在6—24小时内成现先升高后降低趋势并且在 12小时出现最大值。各组肌细胞无机磷含量在力竭运动后6小时有最大值，然后含量降低。结论：高山红景天苷对于调节和 维持细胞能量物质并且对减少疲劳和延缓疲劳具有一定的积极作用。 关键词：高山红景天苷；ATP；AMP；Pi 中图分类号：R285．5 文献标识码 ：A 骨骼肌能量代谢与运动能力的关系密切，近年 高山红景天苷高剂量组200mr,／(kg·d)，中剂 来对能量代谢的研究主要集中于对代谢途径与提高 量组 100mg／(kg ·d)，低剂量组 50mg／(kg ·d)， 各代谢系统的供能效率，以满足各种不同运动对能 阴性对照组给同体积生理盐水，阳性对照组50mg／ 量的需求 ，从而为提高运动成绩提供了可能 j。三 (kg·d)(人参皂苷 Rg1)。灌 胃给药，每只大鼠 1 磷酸腺苷 (ATP)和磷酸肌酸组成了人体最快速的供 mL／次，连续给药 12天。末次给予受试物 30分钟 能系统，即磷酸原供能系统 。运动引起磷酸肌酸 后，在大鼠尾根部负重 5％体重的铅皮，置游泳箱中 下降60％或高能磷酸化合物总量下降40％都将导 游泳。水深不少于50em，水温为26℃。观察大鼠 致二磷酸腺苷 (ADP)，一磷酸腺苷 (AMP)，磷酸 自游泳至力竭的时间，以头部不能露出水面 10秒为 (Pi)等物质浓度上升 J。因此，短时问、大强度运 准 ，引。 动中肌细胞 内AMP和Pj的堆积，可能是导致疲劳 1．3 取材及样品制备 的原因之一。前期实验结果表明，灌 胃红景天苷大 分别于运动后6、12、24小时后三个时间点将大 鼠游泳时间明显延长，因此，高山红景天苷对外周性 鼠断颈处死，每个时间点三只大鼠。迅速在动物股 疲劳大鼠有一定抗疲劳作用L4j。在此基础上本文 四头肌中间部位取材，冰浴条件下去除脂肪和结缔 就测定运动大鼠体内ATP、AMP和 Pi的含量变化 ， 组织，冷生理盐水洗净后称重，立即剪碎 ，加入生理 从而进一步验证红景天苷的抗疲劳作用。 盐水 (1：9w／v)，匀浆，在冰水浴中制成 10％的组织 1 材料与方法 匀浆 ，离心后吸取上清，即得待测定样品，放入 一20 1．1 实验动物及分组 ℃冰箱保存备用。 大鼠，购 自长春国家生物产业基地实验动物中 1．4 测定指标及方法 心，批号SCXK(吉)2004—0005，随机分成6组，每 1．4．1 肌细胞 内ATP和AMP含量 采用高效液 组 12只，分别为正常组、阴性对照组 (生理盐水)； 相色谱法测定ATP，AMP含量 J。色谱条件：Wat