人β防御素3基因工程菌株的IPTG诱导条件优化.pdfVIP

维普资讯 第41卷 第 4期 河 南 农 业 大 学 学报 Vo1．41 No．4 2007伍 8月 JournalofHenanAgriculturalUniversity Aug． 2007 文章编号 ：1000—2340(2007)04—0425—05 人 I3；防御素3基因工程菌株的IPTG诱导条件优化 李春丽，郑振宇，席燕燕 (河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州450002) 摘要 ：对人 B防御素 3基 因工程菌株 BL21一pET—hBD，的摇瓶生长和诱导条件进行 了优化．对装液量、接种量和初 始 pH对菌种生长的影响进行 了比较．结果表明，装液量对菌株生长影响最大．IPTG浓度、诱导时间和诱导温度 对 目的蛋 白表达 的试验结果显示 ，温度是一重要影响因素．进一步研究表 明，菌株在 37℃生长，在 28～34℃以 0．2mmol·L IPTG诱导4h对 目的蛋 白的表达有利 ，目的蛋 白的含量最高可 以达到总蛋 白的29、8％． 关键词 ：人 B防御素 3；大肠杆菌；重组表达 ；优化 中圈分类号 ：S852 文献标识码 ：A OptimizationofConditionsfortheProductionofHuman Defensin3 inE coli InducedbyIPTG LIChun—li，ZHENG Zhen—yu，XIYan—yan (EngineeringCollegeofAnimalHusbandryandVeterinary Science， HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou450002，China) Abstract：Theculturalandinductiveconditionsfortheflask—shakingofE．coliBL21一pET—hBD3have beenoptimized．Theeffectofsuchfactorsasculturevolume，inoculationvolume，andinitialpH val— ue，onthegrowthwascompared．Theresultsshowedthatculturevolumewasofundthatculturevolume wasthemostimportantinfluencingfactoron thegrowth ofstrain．Theinfluencesofconcentration of IPTG ，timeofinductionandtemperatureontheyieldofhBD3wereanalyzedandstudiedindetail．The resultindicatedthatthetemperaturewasthemostimportantfactor．Furtheranalysisshowedthatthe moreaduantageousexpressionlevelofhBD3，ashigh as29．8％ oftotalstrainprotein，couldbegained whenthestrainwasgrownunder37 ℃ andinducedby0．2mmo] ·L- IPTG under28—34 ℃ ofr 4h． Keywords：humanBdefensin3；E．coli；recombinantexpression；optimization 防御素是生物体 内产生的一种具有强烈抗菌 一 ， 具有独特 的研究和开发价值．但是直接分 作用的多肽类物质 ，具有独特 的抗菌机理 ，不易使 离防