全面性癫痫伴热性惊厥附加症家系的临床表型及SCN1B基因的突变筛查.pdf

山东医药2013年第53卷第45期 ·临床研究· 全面性癫痫伴热性惊厥附加症家系的 临床表型及SCNlB基因的突变筛查 席妹景1，常秀红1，张顺清1，黄希顺2 (1濮阳市人民医院，河南濮阳457000；2郑州大学第一附属医院) 摘要：目的分析全面性癫痫伴热性惊厥附加症(GEFS+)家系的临床表型，并检测其SCNlB基因突变情况。 方法收集先证者及家系成员临床资料及外周血，提取基因组DNA，设计引物，进行PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳， 选取符合条件的PCR产物进行双向测序。结果该家系临床表型包括Fs、Fs+伴失神发作，通过PCR对所有 SCNlB的所有外显子进行扩增，所有患者和50例正常对照者的测序结果与基因组序列相对比，均未发现碱基改 变。结论 GEFS+是一种复杂综合征，具有表型异质性，在本家系中未发现SCNlB基因突变，表明GEFS+具有遗 传异质性。 关键词：全面性癫痫伴热性惊厥附加症；SCNlB；家系；基因；突变 doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2013．45．013 中图分类号：R742．1文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2013)45-0035_02 1．2．2 全面性癫痫伴热性惊厥附加症(GEFS+)是一 DNA测序采集所有受试者的外周血1 个以家族为整体进行诊断的癫痫综合征，是儿童期 发病的常染色体显性遗传病。GEFS+具有显著的表 型异质性和强大的遗传基础，不完全外显，也具有遗 对外显子进行引物设计，所有引物均由上海Sangon 公司合成。PCR扩增总反应体系为50止，其中含 传异质性¨’2J。研究表明，离子通道变异与GEFS+ B DNA50—100 密切相关。近年来，随着分子生物学的发展，SCNl ng，M92+1．5mmol／L，10×buffer6肛L， dNTP25pLrnol／L，上下游引物各0．2p。mol／L，Taq酶 和SCNlA基因突变在GEFS+家系中相继被发 (上海Promega公司)2．5 现。3-51。2008年1月～2013年1月，本研究首先对 仪。反应程序：95℃预变性5min；95℃变性30s， 一GEFS+家系进行临床表型分析，然后提取所有患 者及正常对照者的DNA，对钠通道B，亚单位编码50～57℃退火40s，72oC延伸40s，共31个循环；最 基因(SCNlB)进行突变筛查。现报告如下。 后72℃延伸10min。扩增产物4℃保存。取5止 1资料与方法 PCR产物与l止loadingbuffer混合后，于2％琼脂糖 1．1 临床资料该家系为河南汉族人，先证者就诊 凝胶电泳检测，凝胶成像分析仪上照相，观察电泳条 年龄17岁，并跟踪随访2年。家系中三代有8例患带。纯化PCR产物由上海Sangon公司进行双向测序 PRISM (所用测序仪器为ABI 3730，测序试剂为Big— 者，其中男4例(1例已去世)、女4例，7例与 terminator Dye GEFS+表型相一致。另外随机选取50例健康人作 flor se— 为对照组。