第十三章程序性细胞死亡与细胞衰老上edit（上课用）.pptVIP

* * autophagy??英?[??t?f?d??]??美?[?tɑf?d?i]?n. 自我吞噬；自食症；自体吞噬 * 诺 * * 髓磷脂象? ?myelin form，myelin figure 脂质，特别是磷脂质与水接触时，磷脂质从接触面向水相方向突出而形成管状，称此为髓磷脂象。因为同样的结构体最初是从髓磷脂膜发现的，因此称为髓磷脂象。在细胞膜表面，线粒体、高尔基体等也都有所发现，但都与膜构成成分的磷脂质的生成有关。是层状的液晶构造，由于非等方性的关系，在偏光显微镜下，可观察到强的光象。沿长轴的中心线发暗，这种现象可能与管中心部含水有关。髓磷脂象最初出现的状态，从象的延长上来看，于直交尼科耳棱镜暗视野下，可显有黑色十字花状的辉象。此象作为马尔特十字花槽盘（maltese cross）而为人所知。有的认为核糖体就是这种髓磷脂象的小段所形成的闭锁小胞。 * 凋亡细胞细胞膜完整，内含物不会外泄；坏死细胞膜破裂，内含物外泄。 * * 通常细胞凋亡时，细胞内的核酸内切酶活化，会特异性的切断核小体连接区的DNA，造成染色质降解，核小体间片段化，形成 180 ~ 200 bp 整倍数的不同长度DNA片段，在琼脂糖电泳中 DNA 出现 “梯子” 状条带 (DNA ladder)。 而细胞坏死时，DNA断裂为长度不等的片段，在琼脂糖电泳中 DNA 呈现弥散状。 尽管不是所有细胞凋亡都出现梯状条带，但这一特征仍被视为细胞凋亡的特征之一。 Lane 1．0 h； 2．1 h； 3．2 h； 4．3 h； 5．4 h； 6．Control（正常细胞DNA）； 7．Marker * Apaf1（apoptotic protease activating factor-l，细胞凋亡蛋白酶激活因子-1） * Caspase家族 凋亡起始者 凋亡执行者 细胞因子成熟 4、细胞凋亡的分子机制 细胞凋亡的过程可分成两个阶段： 起始阶段：起始caspase活化； 执行阶段：降解细胞组分的caspase活化。 起始阶段 执行阶段 4、细胞凋亡的分子机制 Caspase依赖性的细胞凋亡的起始阶段由两条信号通路介导： 外源性（死亡受体）凋亡通路—The Extrinsic (Death Receptor-Initiated) Pathway of Apoptosis 内源性（线粒体）凋亡通路—The Intrinsic (Mitochondrial) Pathway of Apoptosis 细胞凋亡的两条通路 区别：1.诱导因素不同；2.调控机制不同。 相同：都是通过激活执行者caspase执行凋亡。 胞外信号蛋白与细胞表面死亡受体结合后可激活外源性细胞凋亡途径。 死亡受体：为跨膜蛋白，包含一个胞外配体结合结构域，一个单一的跨膜结构域和一个胞内死亡结构域，它需要受体来激活细胞凋亡程序。这些受体为同型三聚体，属于肿瘤坏死因子（TNF）受体家族，包含一个TNF自身的受体和Fas死亡受体。 激活死亡受体的配体：也是同型三聚体，结构常相互关联，归属于TNF信号蛋白家族。 1、细胞表面死亡受体激活的外源性凋亡途径 通过Fas死亡受体激活外源性凋亡途径 接头蛋白：FADD（Fas-association Death Domain-containing protein) 通过与死亡受体死亡结构域结合而被招募，进而与caspase-8酶原，形成死亡诱导信号复合物DISC（Death Inducing Signaling Complex)。 由死亡受体起始的外源途径：起始于死亡配体与受体的结合 2、依赖线粒体的内源性凋亡途径 在内源性凋亡途径中，线粒体处于中心地位，而细胞色素c从线粒体释放是关键步骤。 当细胞受到外部信号（例如活性氧、紫外线、γ射线、一氧化氮、药物等）或者是内部（如DNA损伤）凋亡信号的刺激时，胞内线粒体外膜的通透性常常会发生改变，向细胞质基质中释放出各种凋亡相关因子，从而引发细胞的凋亡。 依赖线粒体的内源性凋亡途径 凋亡信号 激活感应因子 拮抗Bcl-2蛋白 激活Bax/Bak通道 细胞色素C等的释放 形成凋亡复合体 诱导细胞凋亡 活化Caspase 细胞凋亡过程中线粒体上细胞色素c的释放 培养的人类癌细胞的荧光显微照片：（A）对照细胞被转染进一个编码连接有绿色荧光蛋白（cytochrome-c-GFP）的细胞色素c融合蛋白的基因；它们同时用一种带正电荷的红色染料处理，可在线粒体中积聚。绿色与红色重叠分布的位置表明cytochrome-c-GFP是位于线粒体上。（B）表达了cytochrome-c-GFP的细胞用紫外线照射后诱导细