对IVM影响大P2X4离子通道失活效应的研究.pdfVIP

摘要 摘要 P2X受体家族是一类细胞膜上以胞外ATP(Adenosine Triphosphate)为配体 的非选择性阳离子通道。P2X受体广泛分布于人体的各个组织器官中，因此参与 人体多种重要的生理活动，如炎症反应、神经递质的释放以及神经性疼痛等。 P2X4离子通道电流并显著延长通道失活时间Toff(Deactivationtime)，但对P2X家 族其它类型通道没有影响。 Khakh等人研究表明不同浓度IVM对P2X4离子通道的作用不尽相同：高 浓度与低浓度IVM都可显著增大P2X4通道电流，但高浓度IVM可明显增强ATP 与受体结合，延长P2X4离子通道在撤去ATP后的下。fr值，而低浓度IVM没有这 的结合部位是位于亚基TMs(Transmembmnedomains)之间的疏水间隙；IVM 与ATP结合P2X4通道的部位不重叠。基于前人的研究，本课题提出以下假设： 1，给予低浓度IVM时，P2X4通道结合一个IVM分子，而应用高浓度IVM时， P2X4受体结合2～3个IVM分子，两个IVM共同作用稳定ATP与受体的结合； 2，高浓度IVM间接稳定ATP与受体结合，推测靠近TMs的胞外区是高浓度IVM 效应的响应部位；3，该部位上侧链较大的苯丙氨酸可能是高浓度IVM作用的响 应位点。 本课题目的在于鉴定靠近跨膜区的胞外区中影响高浓度IVM稳定大鼠P2X4 向PCR技术向ratP2X4wT中引入丙氨酸点突变并通过膜片钳全细胞记录模式记 氨酸点突变位点。 实验结果表明：突变体均可形成功能性离子通道；与WT相比，F319A在高 加强。因此得出结论：F200是通道胞外区对高浓度IVM效应的一个响应位点； F330位点影响IVM与受体通道的结合，可进一步验证该位点是否会影响高浓度 IVM的效应。 ATPIVM 关键字： P2X4受体ATP结合胞外区膜片钳失活时间下。ff ABSTRACT ABSTRACT aremembranenon-selectivecation are P2X channels，whichgatedby receptors extracellular P2X are receptorswidely ATP(adenosinetriphosphate)．Because cellsof distributedinbothexcitableandnon．excitable vertebrates，P2Xreceptors mediate manyphysiologyprocessesincluding and releasingneuropathicpain． of kind macrocycliclactone，canspecifically IVM(Ivermectin)，alarge deactivation thecurrent and the time(To由 augment amplitudesignificantlyprolong of thanother ofP2XRs． P2X4Rs(P2X4receptors)rathertypes