SIRT7基因动子与其蛋白稳定性的调控机制研究.pdfVIP

目 录 缩写词表………………………………………………………………………………………………3 中文摘要………………………………………………………………………………………………5 Abstract．．．．．．．．．………．．．．．．．．．．．．．．…．．…．．．．．．．．．．．．．．．…．…．．……．…．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．…．．……．………………．7 前言…………………………………………………………………………………………………10 材料与方法……………………………………………………………………………………一l3 结果…………………………………………………………………………………………………………………………………．27 一SIRT7基因启动子研究……………………………………………………………………27 1 SIRT7mRNA表达谱………………………………………………………………………．．27 2人SIRT7的基因结构………………………………………………………………………．28 3SIRT7基因的转录起始位点的鉴定………………………………………………………一28 4SIRT7基因的启动子的构建………………………………………………………………一30 5 l SIRT7基因启动子删切体的活性分析……………………………………………………～3 6SIRT7基因启动子区一312／-28的结合位点分析…………………………………………．．32 二SIRT7蛋白稳定性的调控机制……………………………………………………………33 1 DNA损伤过程能够影响SIRT7的蛋白水平…………………………………………………33 2 SIRT7蛋白水平受蛋白酶体途径调控……………………………………………………．35 3 SIRT7能够发生泛素化……………………………………………………………………．38 三SIRT7的亚细胞定位………………………………………………………………………．．40 2验证SIRT7C端抗体的特异性………………………………………………………………42 3 四SIRT7去乙酰化酶活性的鉴定……………………………………………………………．44 1体外实验鉴定SIRT7的组蛋白去乙酰化活性……………………………………………44 2免疫荧光法鉴定SIRT7蛋白的组蛋白去乙酰化酶活性…………………………………～46 3 SIRT7对非组蛋白底物的去乙酰化酶活性分析…………………………………………．47 讨 论………………………………………………………………………………………………………………………………49 ／』、 结………………………………………………………………………………………………………………………………52 其他工作……………………………………………………………………………………………．．53 参考文献……………………………………………………………………………………………··54 附录…………………………………………………………………………………………………··57 文献综述………………………………………………………………………………………一57 引物序列………………………………………………………………………………………“64 个人简历…………………………………………………………………………………………67 致 谢……………………………………………………………………………………………一68 独创性声明…………………………………………………………………………………………”69 学位论文版权使用授权书……………………………………………………………………………69 2 缩写词表 Dox Doxorubicin 仪．KG alpha-ketoglutarate ATP adenosine