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高赖氨酸蛋白基对水稻的遗传转化

IIillIIIIllllllllllIIII 7272 中文摘要……………………………………………………………………………………………V 英文摘要…………………………………………………………………………………………….VII 1;;I言……………………………………………………………………………………………………………………………….1 1.1研究的目的和意义……………………………………………………………………………l 1.2文献综述………………………………………………………………………………………2 ‘’■-rrr’LII,r 1.2.1基因工程改良作物赖氨酸含量的研究进展……………………………………………。2 1.2.2无选择标记技术…………………………………………………………………………….5 1.3本论文的主要研究内容……………………………………………………………………。9 2材料与方法………………………………………………………………………………………lO 2.1植物表达载体的构建…………………………………………………………………………lO 2.1.1实验材料…………………………………………………………………………………lO 2.1.2实验方法…………………………………………………………………………………lO 2.2农杆菌介导法转化水稻…………………………………………………………………….13 2.2.1实验材料………………………………………………………………………………。13 2.2.2实验方法……………………………………………………………………………….14 2.3转高赖氨酸基因水稻植株的PCR检测…………………………………………………….15 2.3.1实验材料………………………………………………………………………………..15 2.3.2实验方法………………………………………………………………………………..15 2.4转高赖氨酸基因水稻植株的实时荧光定量PCR(Real.TimePCR)检测…………………16 2.4.1实验材料………………………………………………………………………………..16 2.4.2实验方法………………………………………………………………………………..16 8 2.5转高赖氨酸基因水稻植的赖氨酸水平分析……………………………………………….1 3结果与分析………………………………………………………………………………………19 3.1植物表达载体的构建……………………………………………………………………….19 3.1.1植物载体卡盒的构建…………………………………………………………………..19 3.】.2植物表达载体的构建…………………………………………………………………..26 3.1.3重组质粒导入根癌农杆菌……………………………………………………………。30 3.2农杆菌介导法转化水稻…………………………………………………………………….33 3.3转高赖氨酸基因水稻植株的分子检测…………………………………………………….34 3.3.1转高赖氨酸基因水稻植株的PCR检测………………………………………………..34 3.3.2转高赖氨酸基因水稻植株的实时荧光定量PCR(Real-TimePCR)检测…………….36 3.4转高赖氨酸基因水稻植株

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