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鱼类蛋白质感染因子(PrPc)的研究 摘要 infectious 蛋白质感染因子(proteinaceousagents，Prions)是蛋白本质、导致传 染性海绵样脑病(transmissiblespongiform Protein，PrP)的凝聚体。蛋白质感染因子蛋白种类多，物 般指感染因子蛋白(Prion 种分布广。鱼类也可能通过饲料蛋白形成鱼类Prions和鱼类TSE。因此以重要的 实验室鱼类孔雀鱼及我国的主要淡水经济鱼类鳙鱼、草鱼为研究对象，对蛋白质 感染因子蛋白基因的结构、组织表达及在不同浓度的盐水中此基因表达情况进行 了研究，取得以下结果： 克隆孔雀鱼、鳙鱼和草鱼的蛋白质感染因子蛋白基因，获得孔雀鱼、鳙鱼和 草鱼的PrPc基因序列。分析表明：孔雀鱼PrPc含515个氨基酸，分子量约为54kD， 含534个氨基酸，分子量约为56kD，pI约为8．94。具有蛋白质感染因子蛋白全部 特征结构：信号肽、基本结构、重复肽区域、疏水区域、二硫键、糖基化位点和 一个糖基缩醛磷肌醇位点(GPI)。从鱼类PrP的进化系统树中可知道，此次获得 类蛋白质感染因子。采用染色体步移获得孔雀鱼PrPc对应的基因组DNA片段，长 3,720bp。在孔雀鱼中该基因是由单个外显子编码的，该基因至少包括2个内含子 和2个外显子。 通过半定量RT．PCR检测孔雀鱼PrPc基因在各组织当中的表达情况和在不 向浓度的盐水中的表达情况，结果表明，孔雀鱼PrPc基因在脑、眼、肝胰脏、 肠、肌肉和尾中均有表达，但在脑中表达最丰富。孔雀鱼PrPc基因在5‰盐度的 水中的表达量显著高于清水中的表达量，暗示该基因的表达可能与孔雀鱼抵抗盐 胁迫相关。 本文最后对不同脊椎动物PrPc的球形区域和重复序列进行了系统学分析， 同时对鱼类感染Prions的风险性进行了分析。本研究为蛋白质感染因子蛋白在 鱼类中的进化研究及功能研究，以及可能存在的鱼类传染性海绵样脑病研究提供 了依据。 关键词：蛋白质感染因子表达分析系统学分析孔雀鱼鳙鱼草鱼 I OUS i n Fi onProtei naceousnfecti Agent shes Study Abstract infectious the of Proteinaceous agent(Prions)isaggregateprionprotein,which transmissible isanormal causes spongiformencephalopathy(TSE)．Prionprotein cellular witha andawide ofdistribution．Itis protein largediversity range highly thatPrionsandTSEcouldformincultured the andraw fishes，for possible processing materialsoffishfeedsaresimilartothoseof select mammals．Therefore，we guppy (Poeciliareticulate)，grasscarp(Ctenopharyngodonidellus)an