一种新型稳定的流式细胞术检测NK细胞活性的方法.pdfVIP

·464· ·论著· 一种新型稳定的流式细胞术检测NK细胞 活性的方法 张嘉王晶石 王旖旎 吴林魏娜 汤然 李硕 王昭 【摘要】 目的建立一种新型稳定的流式细胞术检测人外周血NK细胞活性的方法。方法通过 V—PE／ 慢病毒转染技术构建稳定表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的K562靶细胞株，采用Annexin 7AAD凋亡染色标记，进行流式细胞术检测，经NK细胞杀伤作用后，靶细胞的凋亡比例即反映出NK细 胞的杀伤活性。选取43名成年健康志愿者及37例成年噬血细胞综合征(HPS)确诊患者进行NK细胞 活性的检测，比较两者之间NK细胞活性的差异。结果健康志愿者与HPS确诊患者性别比例(男：女 4-7．13)岁比(33．244-10．78)岁]差异均无统计学意义 为2l：22比21：16，)及年龄[(30．53 (P=0．479，P=0．198)，HPS患者NK细胞活性低于健康志愿者[(11．79±2．73)％比(21．084-4．26)％， P0．001]。结论该检测方法快速、准确、稳定，适宜推广，可为NK细胞杀伤活性的检测提供一种新的 方法。 【关键词】 NK细胞活性；流式细胞术；外周血；细胞凋亡 Anew of killer flow stabledetectionmethodnaturalcell activityby cytometryZhang以吗Wang以凡伊^i， Yini，Wu Ran，Li Wang Lin，Wei№TangShuo，WangZhao．DepartmentofHematology,BeijingFriendship 100050，China Hospital,Capita]MedicalUniversity,Beijing Zhoo，Email：zhaowww263@yahoo．corn Correspondingauthor：Wang Toestablishanewstableflow detectionmethodfornaturalkiller 【Abstract】Objective cytometric K562 celllinewithanenhanced inhuman blood．Methods (NK)cell target green activity peripheral fluorescent wasestablishedlentivims—mediatedtransfectionmethod．The protein(EGFP)stableexpression by AnnexinV—PE／7AADdouble markerswereusedfor aflow labeling，followedby cytometric staining apoptosis test．The of cellsreflected ofNKcells．Tothisnovel percentageapoptotictarget cytotoxicactivity verify adult volunteersand37adult wereselectedfor method，43