兽疫链球菌摇瓶发酵法生产透明质酸.pdfVIP

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兽疫链球菌摇瓶发酵法生产透明质酸.pdf

维普资讯 } 2), 第 18卷第 3朝 无 锡 轻 工 大 学 学 报 Vo1.18,No 3 1999年 9月 JournalofWuxiUniversityofLightindustry Sep..1999 文章编号 1999)03—0017-06 兽疫链球菌摇瓶发酵法生产透明质酸 高海军 ,陈 坚 管轶众 ,堵 国成 ,伦世仪 ~ 无锡磊擘生物工程学院,江苏无锡214036) 72 摘要 :研究丁StreptococcuszooepidemicsH23摇瓶发酵生产透明质酸的条件 ,并对发酵机制进 行丁初步探讨.研究发现 .H23在通风和厌氧条件下都能生产透明质酸.透明质酸的合成和菌 体生长是偶联的,对不同的碳瓿质量浓度显示 出不同的规律.酵母膏 、葡萄糖 是合适 的氯源和 碳源 ,初始质量浓度应分别为 2g/dL、4g/dL.Mg 对发酵有很大 的影响,MgSO ·7HO最 佳质量浓度 为0.2g/dL 摇瓶条件如温度 、通风等也影响透明质酸的形成 ,温度 33℃.摇瓶装 液量4OmL时最有利于透明质酸合成.在较适合 的条件下。透明质酸产量可 以达到0.47g/L, 产物对碳源的转化率为2.1 . 关 键 词 透明质酸;摇瓶发酵{通风培养}压氧培养 二 再 中圉分类号l-石五 —— _A— — 。爱 透 明质酸 (hyaluronicacid,简称HA)是以p1—3糖苷键连接的N一乙酰氨基葡萄糖胺和 p1—4糖苷键连接的葡萄糖醛酸组成的二糖单体重复构成的杂多糖.它广泛存在于高等 动物的结缔组织 内,如关节滑液、玻璃样体液、脐带、皮肤、雄鸡冠等中.由于结构上的特点, 当它在水溶液中时 ,具有很高的粘弹性和极强的保水性.目前,HA 已被大量用于临床医疗, 如 “粘性手术”等.它的衍生物也可以作为药物缓释载体、组织修复药物等,在医学上有着广 阔的应用前景 ].传统的获得 HA 的方法是动物组织提取法0].但 自 1937年 Kendall 等H发现溶血性链球菌Streptococcushaemotyticus可 产生 HA后 ,陆续有人报道发现了 能产生 HA 的微生物菌种,此方面 已进行了大量的研究工作.1983年 日本资生堂成功地开 发出微生物发酵法生产的 HA口].发酵法生产HA克服了提取法原料缺乏、工艺复杂的缺 点,降低 了HA 的生产成本 ,大大地推动了HA 的研究和应用.发酵法生产HA 的研究早 已 开展,但其报道多见于专利[5 ],有关微生物较为详细的发酵机制和影响因素的研究报导却 很少.作者对一株链球菌进行了摇瓶发酵的初步研究 ,考察了影响发酵的几种因素,并对发 酵机制进行了初步的探讨. 1 材 料 与 万 法 1.1 菌种 实验菌种为StreptococcuszooepidemicsH23(实验室保藏号). 收稿 日期 1998—09—08;恪订 日期 :1999—0422 作者简介 :高海军 (1969年 9月生),男.江苏滨海人,博士研究生 l7 维普资讯 1.2 培养基 1.2.1 种子培养基 葡萄糖 20g/L,酵母膏 10g/L,牛 肉膏 10g/L,MgSOt·7H2O2g/ L,MnSO ‘·4H2O0.1g/L,KH2PO 2‘g/L,微量元素液 1mL/L,缓冲液 40ml/L,CaCO3 20g/L.其中,微量元素液 内含 (mg/L):CaC122000,MnSO{·4H2O 24,ZnC1246,CuSO~. · 5H2O 19;缓冲液 内含(g/L):Na2HPO ‘·12H2O 36.76,NaH2PO。·12H2O 15.98,NaH— C

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