保肺方对肺间质纤维化大鼠模型细胞外基质代谢影响的实验的研究.pdf

中文摘要 中文摘要 特发性肺间质纤维化(IPF)是一种原因不明，以弥漫性肺泡炎和肺泡结构紊乱并最终导 致肺间质纤维化为特征的疾病。IPF确切发病率尚不清，约为3-s／10万人，且近年来发病率 有增高趋势，其平均5年存活率与肺癌相似。直至今日，IPF治疗尚无特效药物，传统的糖 皮质激素和细胞毒药物疗效不能令人满意。因此，肺纤维化已成为I临床治疗的难点，寻找行 之有效的治疗药物是目前医学界迫切需要解决的问题。 IPF过程中细胞外基质(ECM)合成和降解的失衡，可导致ECM某些成分在肺内过度沉积， 肺纤维化形成。故调节ECM的代谢失衡状态，进而减少其在间质中的沉积，可起到减缓和遏 制肺纤维化发展的作用。中医理论则认为肺纤维化的病位在肺而与多脏相关；在其病机发展 中，虚(气阴两虚)和瘀(瘀血痰浊)贯穿于始终，且随着疾病的进展，病初在气，久则深 及血络。 本课题即针对肺纡维化ECM代谢失衡的病理状态，分为7、14及2 8天三个时间点动态观 察了肺纤维化过程中ECM的变化及中医证候学特点的演变情况，观察了以益肺肾、化痰瘀、 通肺络为法的导师经验方“保肺方”对气管内灌注博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响。 实验研究分为五个部分： l保肺方对肺纤维化大鼠模型病理形态学、肺功能及肺组织羟脯氨酸含量影响的研究 通过对模型动物一般状况的观察(如体重、活动、呼吸等)，对肺指数、肺功能及肺组 织羟脯氨酸的测定及病理形态学研究(HE染色、MASSON染色)，观察保肺方对肺纤维化模型 大鼠的影响。 结果显示，模型大鼠体重下降、活动减少、肺功能各项指标降低，肺指数增加，结合HE 染色可见各时期均有不同程度的肺泡炎、MASSON染色可见肺间质胶原沉积等，表明博菜霉素 诱导的大鼠肺纤维化模型复制成功，出现了类似人类肺纤维化的表现。肺纤维化大鼠经保肺 方治疗后，体重逐渐增加、肺功能指标逐步好转，肺组织羟脯氨酸含量明显下降，病理形态 显示肺泡炎及纤维化程度明显改善。图像分析结果显示，治疗后肺泡腔面积较疗前明显增加， 肺泡炎及纤维化面积明显减少。 结果提示，经保肺方治疗后上述指标可有效地得到改善，保肺方能从功能与结构两方面 减轻IPF的异常改变。 2保肺方对肺纤维化大鼠模型中医证候学影响的研究 通过对模型大鼠呼吸频率、温水游泳时间及血液流变学指标(全血粘度和血浆粘度)的 测定，观察肺纤维化过程中的中医证候学特点及保肺方对其的影响。 结果显示，(1)肺纤维化模型大鼠呼吸急促，呼吸频率较正常组明显增加；全血粘度、血 浆粘度在各个时间点较正常组均有不同程度的升高；肺纤维化大鼠温水游泳时间较正常组明 显减少，运动耐力羽显下降。(2)经保肺方治疗后，肺纤维化大鼠呼吸频率明显下降，全血粘 度和血浆粘度明显降低，温水游泳时间明显延长；经强的松治疗后模型大鼠血液粘度明显升 高，与正常组之间有显著性差异。 结果提示，肺纤维化大鼠出现了气虚血瘀的证候变化，且肺纤维化中气虚、血瘀并不是 独立存在的，而是相互影响，相合致病的。保肺方重视整体调节，其治则兼顾正邪两面，体 保肺方对肺问质纤维化大鼠模型细胞外基质代谢影响的实验研究 现了对病本(气和阴)的保护，及对邪(瘀)的祛除，能有效地改善肺纤维化气虚血瘀的病 理状态。 3保肺方对肺纤维化大鼠模型支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中透明质酸(卧)、层粘连蛋 白(LN)影响的研究 采用放射免疫分析法，对BALF及血清中的LN、HA进行测定，并通过观察保肺方对二者 的影响，从细胞外基质角度来探讨其作用机制所在。 结果显示，(1)肺纤维化模型大鼠各时间点BALF中LN含量明显较正常组高，呈递增趋势。 血清中LN含量也持续升高，且与BALF中LN的升高趋势相一致，二者呈正相关。模型组BALF 中HA含量7天显著高于正常组，但呈下降趋势。血清中HA含量亦较正常组有所增加，但各 组闻比较无显著差异。(2)肺纤维化大鼠经保肺方与强的松治疗后，BALF及血清中LN含量 均明显低于同期模型组，且保肺方作用较激素持久。BFF及强的松治疗后BALF中HA含量较 同期模型组降低，且保肺方的此种作用一直持续到肺纤维化期，作用优于激素。 减轻或抑制了肺泡炎及肺纤维化的发生发展；另一方面起到了保护基底膜的作用，从而使衰 弱的肺气得以恢复。(2)保肺方不仅仅是作用