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不同海参多糖的分离纯化及生化性质分析 不同海参多糖的分离纯化及生化性质分析 摘 要 海参(SeaCucumber)是我国一种传统的名贵滋补品，体内富含多种生物活 性物质，具有较高的食用及药用价值。在我国，人们对于海参及海参制品的需求 随生活水平的提高而日益增加。海参多糖是海参体内最重要的生物活性物质之 一，具有抗凝血、抗血栓、降血脂和抑肿瘤等多种活性。海参多糖主要由海参硫 以9种不同种类和不同生长海域的海参为研究对象，对其体壁中的SC．CHS和 SC—FUC进行了系统的生化性质分析，为海参种类的鉴别、海参品质的评价以及 海参制品质量标准的建立，提供了理论基础和科学依据，具有重要的理论意义和 应用价值。主要内容包括以下几个部分： 1．采用温和的酶提取法获得了9种海参粗多糖，通过DEAE．52离子交换层 析进分级纯化出SC．CHS和SC．FUC2种组分，由高效凝胶过滤色谱法和醋酸纤 1．53万，SC—FUC分 维薄膜电泳法进行了纯度鉴定。SC．CHS的分子量为12．49．2 子量在70万以上。比较而言，温带海域海参富含SC．CHS，热带亚热带海域的 海参富含SC．FUC，而寒带海域海参2种组分的比值介于前两者之间。 糖组成分析、硫酸基含量测定。建立了三氟乙酸水解一离子色谱(IC)测定海参 多糖中硫酸根的方法。SC．CHS的组成单糖在种类上为类硫酸软骨素的特征，主 间的摩尔比呈现一定的种间差异。SC．FUC的单糖组成则以岩藻糖为主。 于同种海参的SC．FUC。 单糖组成分析和硫酸基含量的准确测定对于质量评价标准的建立、海参多糖 的活性研究具有重要意义。 NMR· 不同海参多糖的分离纯化及生化性质分析 分析。 由瓜初步分析SC．CHS岩藻糖支链上硫酸基取代，不同SC．CHS的红外吸 收具有一定的特征差异。红外光谱操作简便、费用低廉，可以作为海参SC．CHS 初步分析鉴定的方法。 经1H NMR分析，根据SC．CHS硫酸酯化岩藻糖支链上异头氢信号和不同海参 的生长海域特征，可以将岩藻糖支链上硫酸基取代归纳为4种类型：1)寒带海域 海参：以2，4一di OS03双取代为主，含部分4．OS03取代；2)温带海 OS03、3,4．di 域海参：以2，4．diOS03取代为主，含部分4．OS03取代；3)热带亚热带海域海参： 只含有2，4．diOS03取代，或以2，4．diOS03取代和4．OS03取代为主，含部分非硫酸 酯化的岩藻糖；4)亚热带热带海域的Sandfish的硫酸软骨素岩藻糖上硫酸基取代 类似于温带海域海参，但4．OS03取代更多。 以1HNMR分析确定SC．CHS中硫酸酯化岩藻糖支链上硫酸基的取代类型，为 SC—CHS的构效关系研究提供了重要的科学依据。 4．建立了市售不同海参制品中海参多糖含量的HPLC澳f]定方法。该方法以岩 藻糖单糖转化系数为媒介，经PMP．HPLC澳JJ定不同海参制品中海参多糖的含量。 该方法具有准确、灵敏的特点，可应用于多种海参制品中总多糖含量的测定，并 为海参质量标准的建立提供了基础方法。 关键词：海参硫酸软骨素；化学组成；岩藻糖支链；硫酸基：差异 2 不同海参多糖的分离纯化及生化性质分析 ■ ■ 一 ■ ● 一● 一 ■ ● ■ ● ’ ■ r l i tI andcharacteri zati onot SOI at i cati on on．pur di fferentki ndsofseacucumberI i des