番茄青枯病拮抗菌筛选鉴定及发酵条件研究.pdfVIP

摘要 111| 摘要 是世界性的难题。本试验针对广东省诱发青枯病的两株主要青枯菌SST-Y和G2MI．70，从健康番茄 根系采集土壤样品，分离筛选出对番茄青枯菌具有良好抑菌活性的土著微生物，对其培养基和发酵 条件进行优化，初步研究了拮抗菌抗菌物质稳定性和抗菌范围，并通过盆栽试验验证其对番茄青枯 病的防治效果，为今后应用于实践提供科学依据，从而使番茄青枯病得到更有效的防治。 试验从不同地点的番茄根系土壤分离微生物，采用平板对峙方法筛选番茄青枯病拈抗菌。每个 地点随机采集9株健康番茄根系O～20 cm深度的土壤样品，分离得到284株菌株，其中33株对番 均具有较强抑菌活性的菌株，其中YB6在牛肉膏蛋白胨培养基上抑菌圈直径17trim，抑菌活性最 强。将4株拮抗菌连续继代培养10次发现只有YB6拮抗效果稳定，因此本试验选取YB6作为试验 对象。 ，． ， 拈抗番茄青枯茵的报道。 ＼ 。 通过单因素试验和正交试验进行发酵条件研究，最佳培养基组成和发酵工艺参数为：以1．5％蔗 9．0的发酵培养基中，3％接种量， 糖为碳源，0．6％酵母浸膏、1．O％蛋白胨及O．3％硫酸铵为氮源，pH 30 oC，100 r／rain恒温连续震荡培养3d。该发酵条件下YB6抑菌活性明显增强，YB6对SST-Y和 G2M1．70抑菌圈直径与初始发酵条件相比分别增加了76．72％和81．140,6。 在不同物理、化学条件下研究抗菌物质稳定性，结果表明：YB6化学稳定性较弱，对pH和蛋 白酶K敏感，pH小于6大于lO条件下和1．5mg／mL以上浓度蛋白酶K均会使其活性显著下降；物 理稳定性中对热较敏感，在60oC及其以上温度失去抑菌活性，紫外线照射5h和35000L光照条件 下均十分稳定。 YB6培养液和YB6无菌上清液分别在4。C和常温条件下保存，结果显示，培养液和无菌上清 液常温保存抑茵活性均要好于4oC保存，并且在4oC和常温下前者抑菌活性好于后者。 YB6固体菌剂吸附载体的研究表明：从菌体吸附量、存活率和抑菌活性综合分析，有机肥、玉 米粉、花生饼粉、草炭、稻杆粉和米糠有机载体吸附效果好于活性碳和蛭石无机载体，其中玉米粉 为载体时菌体吸附量最大，存活率最高，抑菌活性最好。 YB6盆栽试验防治效果研究表明，在番茄幼苗移栽时分别以泡种、浇注、灌根、蘸根方式接种 YB6，其中以蘸根方式接种效果最好，其防治率达到65．O％，效果显著。 YB6抗菌范围试验结果表明，该菌株对水稻纹枯病菌(RhizoetoniasolaniKuhn)、甘蔗黑粉病菌 seitammea (Usfilago Syd．)、柑橘炭疽病菌(Colletotrichum cinerea Pers．)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、香蕉枯萎病菌(Fusariumoxysporum f．sp．cubense)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzea)、水稻细菌’性条斑病菌∞玎历。肌。月珊compeatrispv． 赤霉病抑制效果较强，抑菌率分别达到88．6％和80．2％，说明YB6作为生防菌具有较大的开发潜力。 关键词 番茄青枯病；拮抗菌株：发酵条件；抗菌物质；吸附载体：抗菌范围 ABSTRACT IdentificationandFermentationof Bacterium Antagonistic Ralstonia