非小细胞肺癌组织中BMP-2与CD105的表达和意义.pdf

摘要 摘 要 背景与目的： 肺癌是严重威胁人类健康的疾病之一，迄今为止，仍未找到满意的治疗 方法，因此寻求新的抗肿瘤方法尤为重要。浸润和转移是恶性肿瘤的重要特 征，也是恶性肿瘤难以治愈、导致患者死亡的关键问题。肿瘤血管是恶性肿瘤 生长、侵袭和转移的基础。肿瘤的血管形成不但与肿瘤细胞的营养和供氧程度 有关，而且也反映了肿瘤的侵润和转移能力，是决定肿瘤大小、转移、复发和 预后的重要因素。包括肺癌在内的大部分恶性肿瘤的生长和转移都有血管形成 依赖性的特点。 vascular 肿瘤微血管密度(micro density，MVD)被公认为是反映肿瘤血 管生成最有效的客观指标，已经广泛的被认为是判断肿瘤预后的重要因素。跨 膜糖蛋∈t(CDl05)主要表达在处于增殖状态的血管内皮细胞表达，是新生血管 内皮细胞特异性标志物。此外CDl05通过调节TGF-B的活性，促进血管内皮 细胞的增殖、分化和迁移，参与血管的生成。 factor—p)转化 骨形态发生蛋白(BⅧs)属于(transforminggrowth 生长因子一B超家族中的细胞因子，是一组广泛参与调节多种细胞的增殖、分 化和凋亡的生物学过程的功能蛋白，能诱导前体细胞的迁移和分化，调节细胞 的生长、增殖、迁移和胚胎干细胞的自我更新。目前大部分研究都认为BMP．2 在恶性肿瘤的生长、侵袭、迁移中有非常重要的促进作用。 目前有关BMP．2在肺癌中表达情况的研究甚少，国内目前尚未见报道。 BMP．2与肺癌的关系亦尚不十分明确。为进一步探讨BMP．2和CDl05标志的 MVD与秭癌浸润、转移和血管形成的关系，寻求早期检测肺癌浸润和转移的 指标及寻找抑制肺癌发生和浸润转移的有效方法。本研究课题应用免疫组织化 学方法和免疫印迹法，检测肺癌细胞中BMP．2的肺癌组织中BMP一2和CDl05 标志的MVD的表达情况，同时使用RT-PCR方法测定非小细胞肺癌 癌临床及病理学特征之J、日J的关系。 方法： 1．免疫组织化学方法：检测BMP-2及CDl05在50例非小细胞肺癌组织和lO I 摘要 例正常组织中的表达情况，所选择病例术前未经任何化疗和放疗。 2．免疫印迹(WesternBlot)法检测20例非小细胞肺癌组织和10例正常 组织中BMP-2的表达情况，及其肺癌临床分期的关系。 RT—PCR方法：反转录 取细胞总RNA。1％琼脂糖电泳鉴定其完整性。 lOmin。30次循环扩增，PCR产物于1．5％琼脂糖凝胶中电泳(90V， 35min)。紫外分析仪观察并照相。 统计学处理：所有结果均采用SPSSl3．oft件进行分析，免疫组化法BMP一2蛋 白表达阳性率的分析比较进行x2检验；肿瘤MVD的标志CDl05及其与BMP一2之 Blot结果和RT—PCR结 间关系的分析进行t检验，检验水准Q=0．05,Western 果进行方差分析，PO．05有统计学意义 结果： 1．BMP一2在组织中的表达：在肺癌组和正常组织组中显示BMP一2在非小细 胞肺癌组表达阳性率68％，明显高于对照组正常肺组织中的表达率 O％(PO．05)。在非小细胞肺癌临床病理特征组中显示：I期+II期阳 BMP一2蛋白在低分化的肺癌中阳性表达率为85．0％，明显高于中高分化 肺癌组织中阳性表达率56．7％(PO．05)：有淋巴结转移的阳性表达率 为78．1％，高于无淋巴结转移组50％(PO．05)：然而在性别、年龄和不 同组织类型组之间的表达比较差异无统计学意义(PO．05)。 正常肺组织中，MVD值为30．12士3．2l，两组差异比较有统计学意义 士4．23(pO．05)：然而在性别、年龄和不同组织类型以及肿瘤分化程 度中的表达比较无统计学意