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tcdca对tr5介导的信号通路中amp含量的影响

本研究由国家自然科学基金项目 (No资助 workwas This by supported … 一●● 一●■ oIclllna scienceIoundation thenational (No 摘 要 Acid,TCDCA)作为胆 体内活性物质牛磺鹅去氧胆酸(Taurochenodeoxycholic 汁酸的主要有效成分之一,具有显著地抗炎免疫调节作用。为了深入探讨TCDCA的 抗炎免疫调节作用的分子机制。本文分析了TCDCA对TGR5介导的信号通路中 cAMP含量的影响。其主要研究内容如下: (1)NR8383细胞TGR5基因阻断模型建立的研究 采用阳离子脂质体法,将TGR5siRNA转染到NR8383细胞中。实时荧光定量 PCR和WesternBlot分别检测了NR8383细胞中TGR5mRNA和蛋白表达。结果显 示,转染TGR5siRNA组NR8383细胞上的TGR5mRNA和蛋白的表达显著低于对照 组(尸0.01),TGR5 siRNA的沉默率可达80%。 (2)稳定表达TGR5受体NR8383细胞系的建立 达TGR5的NR8383细胞系,采用实时荧光定量PCR、WesternBlot及免疫荧光技术 定表达TGR5。 的影响 胞内cAMP水平升高的效应与其激动TGR5有关。 特异性抑制剂SQ 细胞内cAMP水平的影响,与AC的活性有关。 AC.cAMP信号通路有关。 本实验研究的主要结论如下: 模型; (2)成功建立了稳定表达TGR5基因的NR8383细胞系: 的AC.cAMP信号通路中。 关键词:牛磺鹅去氧胆酸:TGR5受体;NR8383细胞;环磷酸腺苷 TheEffectsof cAMP Acidon Taurochenodeoxycholic Productionin of TGR5一mediated SignalingPathway ^bstract Acid(TCDCA)嬲oneofthemaineffective of Tauroehenodeoxycholic components bile effectsof and acid(BAs)hadsignificantlyanti—inflammatory to molecular order further the mechanismof and cladfy anti··inflammatory

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